Anti-Phospho-p38 MAPK (Y182) Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q16539

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 (auch bekannt als p38 alpha) ist eine Serin/Threonin-Kinase der p38 MAPK-Familie, die vier Isoformen umfasst: p38 alpha, beta, gamma und delta. Sie wird durch doppelte Phosphorylierung an Thr180 und Tyr182 als Reaktion auf Stress- und Entzündungssignale aktiviert.
• Die Hauptfunktion von MAPK14 ist die Umwandlung extrazellulärer Stimuli in intrazelluläre Antworten, wodurch Genexpression, Zellzyklus, Apoptose und Autophagie reguliert werden. Sie phosphoryliert eine Vielzahl von Substraten, darunter Transkriptionsfaktoren und andere Kinasen.
• Downstream-Ziele umfassen die Kinasen MSK1 und MSK2, die direkt Transkriptionsfaktoren wie CREB1 und STAT1 phosphorylieren sowie Histon H3 phosphorylieren, um die Chromatinremodellierung an frühzeitigen Genen zu ermöglichen. Zugehörige Referenzen: PMID:9687510, PMID:9792677
• MAPK14 aktiviert außerdem MK2 und MK3, die die Genexpression posttranskriptionell steuern, indem sie mRNA-bindende Proteine wie ZFP36 (Tristetraprolin) und ELAVL1 phosphorylieren und so die mRNA-Stabilität und Translation regulieren.
• Im Zellkern phosphoryliert MAPK14 direkt die Transkriptionsfaktoren ATF1, ATF2 und p53/TP53, um stressresponsive Genprogramme zu modulieren. Zugehörige Referenzen: PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• MAPK14 ist an der Zellzykluskontrolle beteiligt; es phosphoryliert CDC25B und CDC25C, fördert deren Bindung an 14-3-3-Proteine und löst nach UV-Bestrahlung eine G2/M-Verzögerung aus. Zugehörige Referenzen: PMID:11333986
• Bei mikrobiellen Infektionen wird MAPK14 in T-Zellen durch Mycobacterium tuberculosis EsxA phosphoryliert, was zur Hemmung der IFN-Gamma-Produktion führt. Zugehörige Referenzen: PMID:21586573
• Subzellulär ist MAPK14 sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern zu finden. Es ist breit exprimiert, mit höheren Gehalten in Gehirn, Herz, Plazenta, Bauchspeicheldrüse und Skelettmuskel und niedrigeren Gehalten in Lunge, Leber und Niere. Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein an Y182 phosphoryliertes synthetisches Peptid, das die Spezifität für die aktivierte Form von p38 MAPK gewährleistet. Bei der Herstellung kundenspezifischer phosphospezifischer Antikörper sollten Sie ein ähnliches Design mit einem Phosphopeptid und einer nicht-phosphorylierten Peptid-Affinitätsmatrix in Betracht ziehen, um phosphospezifische Klone anzureichern.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande bei etwa 41 kDa zu erwarten. Fügen Sie während der Probenvorbereitung Phosphataseinhibitoren hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten. Validieren Sie die Spezifität mit phosphatasebehandelten Lysaten.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) optimieren Sie die Antigen-Retrieval und verwenden Sie geeignete phosphospezifische Kontrollen. Eine Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte ist angegeben, eine Validierung im entsprechenden Probenystem wird jedoch empfohlen.
• In der ELISA kann der Antikörper zum Nachweis von phosphoryliertem p38 MAPK in Zell- oder Gewebslysaten verwendet werden. Sorgen Sie für eine ausreichende Blockierung, um Hintergrundsignale zu minimieren.

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