Anti-Phospho-p38 MAPK (Y182) Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q16539

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 ist eine Serin/Threonin-Kinase, die eine wesentliche Komponente der MAP-Kinase-Signaltransduktions pathway darstellt und zelluläre Antworten auf extrazelluläre Reize wie proinflammatorische Zytokine und physischen Stress vermittelt.
• Sie phosphoryliert und aktiviert Transkriptionsfaktoren (z. B. CREB1, ATF1, RELA, STAT1, STAT3) und Histon H3 über die downstream-Kinasen MSK1 und MSK2 und induziert dadurch sofortige Frühgene als Reaktion auf Stress oder mitogene Stimuli. Verwandte Referenzen: PMID:9687510 PMID:9792677
• MAPK14 reguliert die Proteinsynthese durch Aktivierung von MKNK1/MNK1 und MKNK2/MNK2, welche den Initiationsfaktor EIF4E2 phosphorylieren. Verwandte Referenzen: PMID:11154262
• Sie moduliert den Proteinumsatz durch Phosphorylierung des Ubiquitin-Ligasen SIAH2, steuert den Abbau von EGLN3 und interferiert auch mit der Autophagie durch Beeinflussung des ATG9-Traffickings. Verwandte Referenzen: PMID:17003045 PMID:19893488
• Im Zytoplasma ist der p38 MAPK-Weg ein wichtiger Regulator der Endozytose; beispielsweise hängt die clathrin-vermittelte EGFR-Internalisierung, die durch entzündliche Zytokine und UV-Bestrahlung induziert wird, von der MAPK14-vermittelten Phosphorylierung von EGFR und RAB5A-Effektoren ab. Verwandte Referenzen: PMID:16932740
• MAPK14 phosphoryliert ADAM17, fördert das Ektodomain-Shedding von Liganden der TGF-alpha-Familie und die anschließende Aktivierung der EGFR-Signalisierung. Verwandte Referenzen: PMID:20188673
• Die Kinase phosphoryliert CDC25B und CDC25C, was zu einer G2-Verzögerung nach ultravioletter Strahlung durch Bindung an 14-3-3-Proteine führt. Verwandte Referenzen: PMID:11333986
• MAPK14 lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Kern und wird in Gehirn, Herz, Plazenta, Bauchspeicheldrüse und Skelettmuskel exprimiert, mit niedrigeren Spiegeln in Lunge, Leber und Niere. Die Isoformen MXI2 und EXIP zeigen unterschiedliche Aktivierungs- und Substratspezifitäten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid erhört, das dem Y182-Phosphorylierungsstandort entspricht. Um die Phospho-Spezifität zu bestätigen, sollten Sie Proben mit λ-Phosphatase behandeln oder in Parallelversuchen ein nicht-phosphoryliertes Peptid als Blockierungskontrolle verwenden.
• Für Western Blots verwenden Sie positive Kontrollen wie Zelllysate aus Kulturen, die mit Stressinduktoren (z. B. Anisomycin, UV-Strahlung oder proinflammatorische Zytokine) stimuliert wurden, um eine robuste Phosphorylierung von p38 MAPK Y182 zu induzieren.
• Bei der Durchführung der Immunfluoreszenz sollten Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen sorgfältig optimieren, da harte Behandlungen das Phospho-Epitop beeinträchtigen können. Die Zugabe eines Phosphatase-Inhibitor-Cocktails während der Probenvorbereitung kann helfen, das Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• Der Antikörper ist qualifiziert für WB, IF/ICC und ELISA. Für andere Anwendungen wird eine zusätzliche Validierung im entsprechenden Probensystem empfohlen.

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