Monoklonaler Anti-Phospho-p38 MAPK (T180) Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q16539 / P53778 / Q15759

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 (p38 alpha) ist eine Serin/Threonin-Kinase und ein Kernbestandteil des MAP-Kinase-Signaltransduktionswegs, der auf Stressstimuli und proentzündliche Zytokine reagiert; es ist eines von vier Mitgliedern der p38 MAPK-Familie mit schätzungsweise 200–300 Substraten pro Kinase.
• Die Kinase aktiviert schnell nachgeschaltete Kinasen einschließlich MAPKAPK2/MK2 und MAPKAPK3/MK3, die die Genexpression posttranskriptionell regulieren, indem sie mRNA-bindende Proteine wie ZFP36 und ELAVL1 phosphorylieren und den Translationselongationsfaktor EEF2K modulieren.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:11154262
• Im Zellkern phosphoryliert p38 MAPK Transkriptionsfaktoren (ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, MEF2, p53 usw.) und Chromatinremodellierer, was eine schnelle Induktion von Sofort-Früh- und Entzündungsgenen ermöglicht; die Phosphorylierung von Histon H3 (Ser‑10) durch MSK1/2 erleichtert die Rekrutierung von NF‑κB.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:9687510
  PMID:9792677
  PMID:10330143
  PMID:9430721
  PMID:9858528
• Die Kinase pendelt zwischen Zytoplasma und Zellkern und ist an vielfältige zelluläre Prozesse beteiligt: sie reguliert den Proteinumsatz (z. B. CFLAR-Stabilität, SIAH2-vermittelte Degradation von EGLN3), Autophagie (ATG9-Transport), Rezeptor-Endozytose (EGFR über RAB5A-Effektoren) und Ektodomänenabschuppung (ADAM17-Phosphorylierung).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:17003045
  PMID:19893488
  PMID:16932740
  PMID:20188673
• MAPK14 wird an Thr‑180 und Tyr‑182 innerhalb der Aktivierungsschleife phosphoryliert, ein duales Ereignis, das für die Kinaseaktivität essenziell ist; weitere posttranslationelle Modifikationen umfassen Acetylierung und Ubiquitinierung, wie in den UniProt-Schlüsselwörtern angegeben.
• Das Protein ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Gehalten in Gehirn, Herz, Plazenta, Bauchspeicheldrüse und Skelettmuskel; eine geringere Expression wird in Lunge, Leber und Niere beobachtet.
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen wie MXI2 (reagiert auf Mitogene und oxidativen Stress) und EXIP (beteiligt am Beginn der frühen Apoptose), die unterschiedliche Substratpräferenzen und Signaloutputs aufweisen.
• Als Reaktion auf DNA-Schäden phosphoryliert MAPK14 CDC25B/C, was zum G2-Arrest führt, und TIAR zur Stabilisierung der GADD45A-mRNA; es aktiviert auch das NLRP1-Inflammasom nach UV-B-Bestrahlung oder Ribosomenkollisionen.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:11333986
  PMID:20932473
  PMID:35857590

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem phosphorylierten Peptid um Thr‑180; daher detektiert der Antikörper primär aktiviertes (phosphoryliertes) p38 MAPK. Zur Überprüfung sollten Sie Proben mit λ-Phosphatase behandeln oder nicht stimulierte Kontrolllysate verwenden, um die Phosphospezifität im Western Blot zu bestätigen.
• Für die Immunhistochemie (IHC‑P) kann die Antigenretrieval in der Mikrowelle oder im Schnellkochtopf die Detektion von Phospho-Epitopen verbessern; validieren Sie die Färbespezifität durch Vorinkubation des Antikörpers mit dem immunisierenden Phosphopeptid.
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz zur Quantifizierung von aktiviertem p38 in Zelllysaten verwendet werden; fügen Sie wenn möglich rekombinantes phosphoryliertes p38-Protein als Standardkurvenkontrolle hinzu.
• Bei der Analyse mehrerer p38-Isoformen beachten Sie, dass dieser Antikörper aufgrund der hohen Sequenzhomologie um Thr‑180 wahrscheinlich mit p38 beta (MAPK11) und gamma (MAPK13) kreuzreagiert; validieren Sie die Isoformspezifität in Ihrem relevanten Probensystem.

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