Anti-Phospho-NRF2-S40 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q16236

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NRF2-Funktion und -Lokalisierung

• Proteinidentität: NRF2 (Nuclear factor erythroid 2-related factor 2), kodiert durch das NFE2L2-Gen, ist ein basischer Leucin-Zipper (bZIP)-Transkriptionsfaktor, der zur Cap'n'Collar (CNC)-Familie gehört.
• Regulation der Antioxidansantwort: NRF2 bindet an Antioxidans-Response-Elemente (ARE) in den Promotoren zytoprotektiver Gene, einschließlich Phase-2-Entgiftungsenzyme, um deren Expression zu fördern und reaktive Elektrophile zu neutralisieren. Verwandte Referenzen: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• KEAP1-vermittelte Abbau: Unter basalen Bedingungen wird NRF2 durch das BCR(KEAP1)-Komplex für Ubiquitinierung und proteasomalen Abbau markiert, wodurch seine zytoplasmatischen Spiegel niedrig gehalten werden. Verwandte Referenzen: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201
• Aktivierung durch oxidativen Stress: Bei oxidativem Stress hemmen Elektrophil-Metabolite die KEAP1-Aktivität, wodurch NRF2 sich ansammeln und in den Zellkern translozieren kann, wo es mit kleinen Maf-Proteinen Heterodimere bildet und die Transkription aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:19489739, PMID:29590092
• Autophagie-vermittelte Aktivierung: Selektive Autophagie löst ebenfalls die NRF2-Aktivierung über die SQSTM1/p62-vermittelte Inaktivierung des KEAP1-Komplexes aus und verknüpft so Autophagie mit Redox-Homöostase. Verwandte Referenzen: PMID:20452972
• Angeborene Immunität und antivirale Abwehr: NRF2 unterdrückt die antivirale zytosolische DNA-Erkennung durch Suppression der STING1-Expression und begrenzt die Freisetzung proinflammatorischer Zytokine während Virusinfektionen, einschließlich SARS-CoV-2, durch IRF3-Hemmung. Es hemmt auch die Replikation mehrerer Viren auf interferonunabhängige Weise. Verwandte Referenzen: PMID:30158636, PMID:33009401
• Subzelluläre Lokalisierung und posttranslationale Modifikationen: NRF2 wandert zwischen Zytoplasma und Zellkern. Es unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität und transkriptionelle Aktivität streng kontrollieren.
• Gewebeverteilung: NRF2 ist weit verbreitet exprimiert, wobei die höchsten Spiegel im Muskel Erwachsener, in der Niere, Lunge, Leber und im fetalen Muskel nachgewiesen wurden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Resten um Ser40 von menschlichem NRF2 entspricht. Für eine phosphorylierungsspezifische Detektion bestätigen Sie, dass das Epitop in Ihrem experimentellen System exponiert ist; erwägen Sie eine Behandlung der Proben mit Phosphatasehemmern, um das Phospho-Signal zu erhalten.
• Bei der Durchführung eines Western Blots beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~68 kDa; überprüfen Sie die Bandspezifität mithilfe von positiven und negativen Kontrollen (z. B. oxidativ gestresste vs. unbehandelte Zellen oder KEAP1-Knockdown-Modelle).
• Für IF/ICC optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um die Integrität des Phospho-Epitops zu erhalten; verwenden Sie 4% PFA-Fixierung und eine milde Detergens-Permeabilisierung als Ausgangspunkt.
• Dieser Antikörper ist geeignet für WB, IF/ICC und ELISA. Es ist ratsam, den Antikörper für jede Anwendung zu titrieren und in den relevanten menschlichen Probentypen zu validieren.

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