Anti-Phospho-NRF2-S40 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB - Q16236

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NRF2-Funktion und Lokalisierung

• NRF2 (Nuclear factor erythroid 2-related factor 2), kodiert durch NFE2L2, ist ein Transkriptionsfaktor, der zelluläre Reaktionen auf oxidativen Stress reguliert, indem er an Antioxidant Response Elements (AREs) in Promotoren zytoprotektiver Gene bindet.
  Verwandte Referenzen: PMID:11035812 PMID:19489739 PMID:29018201
• Unter basalen Bedingungen wird NRF2 über KEAP1-vermittelte Ubiquitinierung und proteasomalen Abbau im Zytoplasma auf niedrigem Niveau gehalten.
  Verwandte Referenzen: PMID:11035812 PMID:15601839 PMID:29018201
• Bei oxidativem Stress oder elektrophiler Herausforderung wird KEAP1 gehemmt, wodurch NRF2 in den Zellkern translozieren, mit kleinen Maf-Proteinen dimerisieren und die ARE-gesteuerte Gentranskription aktivieren kann.
  Verwandte Referenzen: PMID:19489739 PMID:29590092
• NRF2 ist auch an selektiver Autophagie beteiligt, wobei die SQSTM1/p62-KEAP1-Interaktion zur NFE2L2-Stabilisierung und Wegaktivierung führt.
  Verwandte Referenzen: PMID:20452972
• Über die Redox-Regulation hinaus unterdrückt NRF2 angeborene Immun- und Entzündungsreaktionen, indem es die Transkription proinflammatorischer Zytokine blockiert und die IRF3-Dimerisierung hemmt, und es schränkt die Replikation von Viren einschließlich SARS-CoV-2, HSV und Zika-Virus ein.
  Verwandte Referenzen: PMID:30158636 PMID:33009401
• NRF2 ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Leveln in adultem Muskel, Niere, Lunge, Leber und fetalem Muskel. Subzellulär pendelt es zwischen Zytoplasma und Zellkern.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (z.B. an Ser-40), Acetylierung, Glykierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität und Aktivität modulieren.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen von NRF2.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting sollten reduzierende Bedingungen und das Laden angemessener Proteinmengen aus Zelllysaten, die mit oxidativen Stressoren (z.B. H₂O₂) behandelt wurden, in Betracht gezogen werden, um die NRF2-Phosphorylierung an Ser-40 zu detektieren.
• Für IHC-P sollte die Färbung in NRF2-positiven Geweben wie Leber oder Niere validiert werden, und Phosphataseinhibitoren sollten während der Probenvorbereitung verwendet werden.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet; die erwartete Bandengröße (~68 kDa) in relevanten Spezies sollte verifiziert werden.
• Bei der Immunfluoreszenz sollte die Kerntranslokation nach Induktion von oxidativem Stress überwacht werden.
• Für ELISA sollten phosphorylierte Peptidkontrollen zur Bestätigung der Spezifität verwendet werden.

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