Anti-Phospho-NPM1-T199 Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – P06748

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Nucleophosmin

• Nucleophosmin (NPM1, auch bekannt als B23, NO38, Numatrin) ist ein nucleoläres Phosphoprotein, das für die Ribosomenbiogenese essenziell ist und die Prozessierung von rRNA sowie den nuklearen Export von Ribosomen koordiniert.
• Dient als Histon-Chaperon für die Core-Histone H3, H2B und H4 und erleichtert die korrekte Chromatinassemblierung und Nukleosomenbildung.
• Reguliert die Zentrosomenduplikation und Centriolenreplikation; die Phosphorylierung durch PLK2 löst die Centriolenreplikation aus.
• Reguliert die Aktivierung von EIF2AK2/PKR negativ und unterdrückt die Apoptose; antagonisiert die durch ATF5 induzierte G2/M-Blockade, um die Zellproliferation zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:22528486
• Interagiert mit MYC, um die Transkription von MYC-Zielgenen zu verstärken, was potenziell zur Onkogenese beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:25956029
• Lokalisiert überwiegend im Nukleolus, kommt aber auch in Nukleoplasma, Zytoplasma und Zentrosomen vor – was seine vielfältigen zellulären Funktionen widerspiegelt.
• Unterliegt zahlreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung (z. B. Thr199), Acetylierung, ADP-Ribosylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und subzelluläre Prozessierung modulieren.
• Überexpression und Mutationen (z. B. zytoplasmatische Dislokation) sind mit akuter myeloischer Leukämie und anderen Krebserkrankungen verbunden, was seine Rolle als Proto-Onkogen unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser phosphospezifische Antikörper wurde gegen ein an Thr199 phosphoryliertes synthetisches Peptid hergestellt; für WB sind bei der Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren hinzuzufügen, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Validieren Sie den Antikörper in Ihrem experimentellen System durch Vergleich der Signale zwischen unbehandelten und phosphatasebehandelten Lysaten oder durch Blockierung mit nicht phosphoryliertem Peptid.
• Für ELISA: Beschichten Sie mit phosphoryliertem Peptid, um die Spezifität zu beurteilen, und erwägen Sie einen Kreuzreaktivitätstest mit nicht phosphoryliertem NPM1.
• Da NPM1 unter bestimmten Bedingungen zum Zytoplasma shuttleiert, kann eine Fraktionierung oder Immunfluoreszenz die Erfassung der subzellulären Verteilung von Phospho-NPM1 ergänzen.

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