Anti-Phospho-NMDAR1 (S896/S897) polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q05586

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NMDAR1 (GluN1) Funktion und Lokalisierung

• Kodiert durch das GRIN1-Gen, ist das GluN1-Protein (auch als NR1, NMDAR1 bezeichnet) die obligatorische Untereinheit von NMDA-Rezeptoren, die für die exzitatorische Neurotransmission im Zentralnervensystem essentiell sind.
• NMDA-Rezeptoren bilden heterotetramere, ligandengesteuerte Kationenkanäle mit hoher Calciumpermeabilität und spannungsabhängiger Magnesiumblockade, die zur synaptischen Plastizität, Lernen und Gedächtnis beitragen (PubMed:21376300, PubMed:26875626, PubMed:26919761). Verwandte Referenzen: PMID:21376300 PMID:26875626 PMID:26919761
• Die GluN1-Untereinheit assembliert mit GluN2 (A-D) oder GluN3 (A-B) Untereinheiten, um funktionelle NMDA-Rezeptoren zu bilden; verschiedene Untereinheitszusammensetzungen verleihen dem Kanal unterschiedliche pharmakologische und kinetische Eigenschaften (PubMed:26875626, PubMed:26919761, PubMed:36309015). Verwandte Referenzen: PMID:26875626 PMID:26919761 PMID:36309015
• Die Kanalöffnung erfordert gleichzeitige Bindung von L-Glutamat an die GluN2-Untereinheit und Glycin oder D-Serin an die GluN1-Untereinheit, zusammen mit Membrandepolarisation, um die spannungsabhängige Mg²⁺-Blockade aufzuheben; dies ermöglicht Ca²⁺- und Na⁺-Einstrom und K⁺ -Ausstrom (PubMed:21376300, PubMed:26875626, PubMed:26919761). Verwandte Referenzen: PMID:21376300 PMID:26875626 PMID:26919761
• Die C-terminale Domäne von GluN1 unterliegt umfangreicher posttranslationaler Modifikation, einschließlich Phosphorylierung an den Resten Ser896 und Ser897, die den Rezeptortransport und die Funktion modulieren kann.
• NMDA-Rezeptoren befinden sich vorwiegend an der postsynaptischen Dichtemembran exzitatorischer Synapsen, was sie in den Kern der synaptischen Signalgebung und Plastizität stellt.
• Mutationen in GRIN1 sind mit neuroentwicklungsbedingten Störungen assoziiert, einschließlich Epilepsie, geistiger Behinderung und entwicklungsbedingter und epileptischer Enzephalopathie (DEE101), was die kritische Rolle von GluN1 in der Gehirnfunktion unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper die Phosphorylierung an S896/S897 erkennt, sollten Phosphataseinhibitoren während der Probenvorbereitung eingeschlossen werden, um das Phospho-Epitop zu erhalten.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von NMDAR1 ~105 kDa; verwenden Sie einen geeigneten Gelprozentsatz (z.B. 8–10% SDS-PAGE) und Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• Validieren Sie die Spezifität durch Peptid-Konkurrenz-Assays: Präinkubieren Sie den Antikörper mit dem phosphorylierten Immunogenpeptid oder einem nicht-phosphorylierten Peptid, um die phospho-spezifische Erkennung zu bestätigen.
• Für ELISA kann der Antikörper mit dem phosphorylierten Peptid als Beschichtungsantigen verwendet werden; optimieren Sie die Beschichtungskonzentration und Nachweisbedingungen.
• Erwägen Sie die Verwendung von Positivkontroll-Lysaten aus humanem, Maus- oder Rattenhirngewebe oder neuronalen Zelllinien, von denen bekannt ist, dass sie NMDAR1 exprimieren.
• Kreuzreaktivität mit Human, Maus und Ratte deutet auf ein konserviertes Epitop hin; führen Sie jedoch eine Validierung in der relevanten Spezies und im Modellsystem durch.

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