Anti-Phospho-NFKB1 (S932) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB - P19838

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: NFKB1-Funktion und -Lokalisierung

• Das NFKB1-Gen kodiert das p105-Vorläuferprotein, das anschließend verarbeitet wird, um die aktive p50-Untereinheit (Nuclear factor NF-kappa-B p50) zu produzieren (PubMed:1423592). Verwandte Referenzen: PMID:1423592
• Das p105-Vorläuferprotein dient auch als zytoplasmisches Retentionsprotein für andere Mitglieder der NF-kB-Familie und hält diese im Zytoplasma zurück, bis Aktivierungssignale empfangen werden.
• Die p50-Untereinheit bildet Heterodimere mit RELA/p65, um den kanonaren NF-kB-p65-p50-Komplex zu bilden, der an die kB-Konsensussequenz 5'-GGRNNYYCC-3' bindet und die Transkription der Zielgene aktiviert (PubMed:1740106, 7830764). Verwandte Referenzen: PMID:1740106 PMID:7830764
• NF-kB ist ein pleiotroper Transkriptionsfaktor, der an Entzündungen, Immunantwort, Zellproliferation, Differenzierung und Apoptose beteiligt ist und als zentraler Vermittler von Stress- und pathogeninduzierten Signalwegen wirkt.
• Der inaktive NF-kB-Komplex wird im Zytoplasma durch IkB-Inhibitoren zurückgehalten; nach Stimulation wird IkB durch IKK-Kinasen phosphoryliert und abgebaut, wodurch NF-kB freigesetzt wird, um in den Zellkern zu translozieren und die Genexpression zu regulieren.
• NFKB1 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Ubiquitinierung und Hydroxylierung, die seine Stabilität, DNA-Bindungsaktivität und transkriptionelle Kompetenz modulieren.
• Subzelluläre Lokalisierung: Im Zytoplasma und Zellkern zu finden, wobei der Transport zwischen diesen Kompartimenten streng durch stimulationsabhängige Signalwege gesteuert wird.
• Alternativ gespleißte Isoformen und mehrere Familienmitglieder (RELA, RELB, REL, NFKB2) erzeugen diverse Dimerkombinationen mit unterschiedlichen Funktionen, von der transkriptionellen Aktivierung bis zur Repression.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das den Resten um Ser932 von humanem NFKB1 entspricht; dieser Antikörper ist darauf ausgelegt, NFKB1 nur dann zu erkennen, wenn es an dieser Stelle phosphoryliert ist.
• Für den Western Blot sollten während der Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren zugegeben werden, um den Phosphorylierungszustand zu erhalten. Vergleichen Sie von stimulierten und unstimulierten Zelllysaten, um die Phosphospezifität zu bestätigen.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht des p105-Vorläuferproteins beträgt ~105 kDa, während die verarbeitete p50-Untereinheit bei ~50 kDa wandert; beide Bänder können je nach Probenbedingungen nachgewiesen werden.
• Dieser Antikörper wurde für Western Blot bei humanen, murinen und rattigen Proben validiert; andere Anwendungen wurden nicht getestet und sollten vom Endbenutzer optimiert werden.

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