Anti-Phospho-mTOR-S2448 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P42345

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: mTOR-Funktion und -Lokalisierung

• Die Serin/Threonin-Proteinkinase mTOR (auch bekannt als FRAP, RAFT1, RAPT1) fungiert als zentraler Regulator des Zellstoffwechsels, des Wachstums und des Überlebens und integriert Signale von Hormonen, Wachstumsfaktoren, Nährstoffen, Energie und Stress. Verwandte Referenzen: PMID:12087098, PMID:12150925, PMID:12150926

• mTOR funktioniert innerhalb zweier unterschiedlicher Komplexe, mTORC1 und mTORC2, die jeweils anabole und zytoskelettale Prozesse steuern. Verwandte Referenzen: PMID:15268862, PMID:15467718, PMID:18497260

• Über mTORC1 fördert es die Proteinsynthese durch Phosphorylierung von Translationsregulatoren (z. B. EIF4EBP1, RPS6KB1/RPS6KB2) und verstärkt die Lipid- und Nukleotidsynthese (über SREBF1, CAD und den Pentosephosphatweg). Verwandte Referenzen: PMID:12087098, PMID:12150925, PMID:12150926, PMID:24403073, PMID:29236692, PMID:18925875, PMID:23429703, PMID:23429704

• mTORC1 hemmt auch katabole Wege, hauptsächlich die Autophagie, indem es unter nährstoffreichen Bedingungen ULK1, DAP, RUBCNL und AMBRA1 phosphoryliert. Verwandte Referenzen: PMID:32561715, PMID:20537536, PMID:30704899, PMID:23524951, PMID:25438055

• Der mTORC2-Komplex vermittelt Wachstumssignale durch Aktivierung von AGC-Kinasen (AKT, PKC, SGK1) und reguliert das Aktin-Zytoskelett sowie die Insulinsignalisierung. Verwandte Referenzen: PMID:15268862, PMID:15467718, PMID:21376236, PMID:15718470, PMID:24670654, PMID:18925875

• mTOR lokalisiert sich an mehrere zelluläre Membranen, einschließlich des Lysosoms (für die mTORC1-Aktivierung) sowie des endoplasmatischen Retikulums, des Golgi-Apparats, der Mitochondrien und der Plasmamembran; er wandert auch in den Zellkern.

• Wird in vielen Geweben exprimiert, wobei die höchsten Spiegel im Hoden zu finden sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper erkennt spezifisch die Phosphorylierung an Ser2448 von mTOR; erwägen Sie die Zugabe von Phosphatase-Inhibitoren zu den Lysepuffern für Immunoblots.
• Für Western Blots (WB) validieren Sie den Antikörper in Ihrem Probenystem unter Bedingungen, die mTOR aktivieren (z. B. Wachstumsfaktor-Stimulation), um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Optimieren Sie bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um das Phospho-Epitop zu erhalten und gleichzeitig einen ausreichenden Antikörperzugang zu gewährleisten.
• Da mTOR ein großes Protein ist (289 kDa), verwenden Sie geeignete Gelkonzentrationen (z. B. 6–8 % SDS-PAGE) und verlängerte Transferzeiten für das Blotting.

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