Anti-Phospho-MKK3 (S189) + MKK6 (S207) Kaninchen monoklonaler Antikörper für MK/IF/ELISA - P46734 / P52564

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MKK3- und MKK6-Funktion und -Lokalisierung

• MKK3 (MAP-Kinase-Kinase 3), auch bekannt als MEK3 oder SAPKK2, wird vom MAP2K3-Gen kodiert und gehört zur Familie der dual-spezifischen Proteinkinasen. Er ist eng mit MKK6 (kodiert von MAP2K6) verwandt; beide Proteine weisen eine hohe Homologie auf und fungieren als Schlüsselaktivatoren der p38-MAP-Kinasen.
• Als dual-spezifische Kinase katalysiert MKK3 die gleichzeitige Phosphorylierung von Threonin- und Tyrosinresten in der Aktivierungsschleife der p38-MAP-Kinase-Isoformen, ein kritischer Schritt in der Stress-responsiven Signalübertragung.
• MKK3 wird in vivo durch verschiedene Umweltstressoren und proinflammatorische Zytokine aktiviert und verknüpft extrazelluläre Signale mit intrazellulären Reaktionen wie Entzündung, Differenzierung und Apoptose.
• Er operiert innerhalb eines Signaltransduktionswegs, der durch den adrenergen Rezeptor ADRA1B eingeleitet wird und zur Aktivierung von MAPK14 (p38α) führt, was seine Rolle in der G-Protein-gekoppelten Rezeptorsignalgebung hervorhebt.
• Auf Gewebenebene zeigt MKK3 eine reichhaltige Expression in der Skelettmuskulatur und ist weitgehend in anderen Geweben exprimiert, was auf eine breite Beteiligung an der Stress- und Stoffwechselregulation hindeutet.
• Posttranslationale Modifikationen von MKK3 umfassen Acetylierung und Phosphorylierung; das S189-Rest ist eine kritische Aktivierungsstelle. Das Protein unterliegt auch alternatives Spleißen, das mehrere Isoformen erzeugt.
• MKK3 ist mit Krankheitsvarianten assoziiert, und seine Dysregulation wurde mit pathologischen Zuständen in Verbindung gebracht, was seine Bedeutung als therapeutisches Ziel unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper die Phosphorylierung an S189 von MKK3 und S207 von MKK6 erkennt, verwenden Sie während der Zelllyse und Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren, um die Phosphorylierungssignale zu erhalten.
• Für den Western Blot sollten Sie als Positivkontrollen Proben laden, die mit Stressinduktoren (z. B. Anisomycin, UV oder osmotischer Schock) behandelt wurden, um die Reaktivität des Antikörpers gegen die aktivierten Formen zu verifizieren.
• Validieren Sie den Antikörper in der Immunfluoreszenz in relevanten Zelllinien unter stimulierten gegenüber unstimulierten Bedingungen, um die spezifische Lokalisierung des Phospho-Signals zu bestätigen.
• Es können mehrere Bänder beobachtet werden, die verschiedenen Isoformen und Spleißvarianten entsprechen (berichtete Molekulargewichte ca. 36–39 kDa für MKK3 und 31–37 kDa für MKK6); konsultieren Sie die spezifischen Proteingewichte und stellen Sie sicher, dass geeignete Molekulargewichtsmarker verwendet werden.

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