Anti-Phospho-MET-Y1234/1235 Kaninchen pAb für WB, ELISA - P08581

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MET-Funktion und Lokalisierung

• MET, auch bekannt als Hepatocyte Growth Factor Receptor (HGFR), Proto-Onkogen c-Met und Scatter Factor Receptor, ist ein Rezeptor-Tyrosinkinase, der nach Bindung seines Liganden HGF Signale aus der extrazellulären Matrix weiterleitet. Es reguliert Schlüsselprozesse wie Proliferation, Streuung, Morphogenese und Überleben.
• Nach Ligandenbindung unterzieht sich MET einer Autophosphorylierung an Tyrosinresten einschließlich Y1234 und Y1235 in der Aktivierungsschleife, wodurch Andockstellen für nachgeschaltete Effektoren wie PI3K, PLCG1, SRC, GRB2, STAT3 und GAB1 entstehen. Dies löst mehrere Kaskaden aus: RAS-ERK (morphogenetische Effekte), PI3K-AKT (Überlebenssignal) und PLCgamma-PKC-Wege.
• Während der Embryonalentwicklung ist die MET-Signalübertragung essentiell für die Gastrulation, die Migration neuronaler Vorläuferzellen, die Angiogenese, die Nierenbildung und die Entwicklung der Skelettmuskulatur (Migration von Muskelvorläuferzellen und Proliferation sekundärer Myoblasten). Bei Erwachsenen trägt es zur Wundheilung, Organregeneration, Gewebeumbau und Hämatopoese bei.
• MET ist primär in der Zellmembran lokalisiert, aber es existiert auch eine sekretierte Form. Es wird in normalen Hepatozyten und Epithelzellen des Magens, Dünn- und Dickdarms exprimiert, sowie in basalen Keratinozyten der Speiseröhre und Haut. Hohe Expression wird in Leber, Magen-Darm-Trakt, Schilddrüse, Niere und Gehirn beobachtet, mit nachweisbaren Proteinspiegeln im metaphysären Knochen. Verwandte Referenzen: PMID:26637977
• Das Protein fungiert als Rezeptor für Internalin InlB von Listeria monocytogenes und vermittelt den Eintritt der Bakterien in Wirtszellen.
• MET wird als Tyrosin-Protein-Kinase, Glykoprotein und Phosphoprotein klassifiziert und ist mit chromosomalen Umlagerungen verbunden, die mit Krankheiten in Verbindung stehen. Es unterliegt auch alternativem Spleißen und Ubiquitin-Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das Y1234 und Y1235 von humanem MET umspannt. Für WB und ELISA sollten Sie die Einbeziehung von Nicht-Phosphopeptid-Kompetition oder Phosphatase-behandelten Lysaten in Betracht ziehen, um die Phosphorylierungsspezifität zu bestätigen.
• Für WB ist eine Bande bei etwa 156 kDa zu erwarten. Da MET ein Membranprotein ist, verwenden Sie geeignete Lysepuffer (z.B. RIPA) und schließen Sie Protease-/Phosphatase-Inhibitoren ein. Für ELISA validieren Sie den Antikörper mit beschichtetem Phospho-Peptid und geeigneten Kontrollen.
• Die Stimulation von Zellen mit HGF vor der Lyse kann die Detektion von phosphoryliertem MET an diesen Stellen verbessern. Seien Sie sich der basalen Phosphorylierungsniveaus in Ihrer interessierenden Zelllinie bewusst.
• Dieser Antikörper ist für humane Proben validiert; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies ist nicht etabliert.

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