Anti-Phospho-MEK2 (T394) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und IF/ICC - P36507

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MEK2-Funktion und -Lokalisierung

• MEK2 (MAP2K2) ist eine duale spezifische mitogenaktivierte Proteinkinase-Kinase, die die Phosphorylierung von Threonin- und Tyrosinresten im Thr-Glu-Tyr-Motiv der downstream MAP-Kinasen, einschließlich ERK1 und ERK2, katalysiert.
• Sie fungiert als zentrale Komponente des MAPK/ERK-Signalwegs und aktiviert direkt ERK1 und ERK2 als Reaktion auf upstream-Stimuli, wodurch die Zellproliferation, -differenzierung und das Überleben reguliert werden.
• MEK2 erleichtert die BRAF-Aktivierung durch Bindung an KSR1 oder KSR2, wodurch hemmende intramolekulare Wechselwirkungen gelöst und die KSR-BRAF-Dimerisierung gefördert werden, was die Signalweiterleitung verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:29433126
• Das Protein lokalisiert sich vorwiegend im Zytoplasma und an der Membran, was seiner Rolle bei der Übertragung extrazellulärer Signale an intrazelluläre Effektoren entspricht.
• Die Phosphorylierung bei Thr-394 (das Epitop, das von diesem Antikörper Ziel genommen wird) ist eine kritische regulatorische posttranslationale Modifikation; MEK2 unterliegt auch Acetylierung, was seine Aktivität und Wechselwirkungen beeinflusst.
• MEK2 enthält eine ATP-Bindungstasche und benötigt Magnesiumionen für die katalytische Aktivität, was sie als Serin/Threonin- und Tyrosin-Dualspezifitätskinase klassifiziert.
• Mutationen in MAP2K2 wurden mit menschlichen Erkrankungen in Verbindung gebracht, einschließlich Kardiomyopathie, ektodermaler Dysplasie und geistiger Behinderung, was ihre biologische Bedeutung unterstreicht.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht von MEK2 beträgt ca. 44 kDa, was mit der erwarteten Bande übereinstimmt, die in Western Blot-Analysen beobachtet wird.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen war ein phosphospezifisches Peptid, das eine Reaktivität nur mit der phosphorylierten T394-Form sicherstellt; validieren Sie die Spezifität durch Behandlung von Lysaten mit Lambda-Phosphatase oder durch Peptid-Wettbewerbsassays.
• Für den Western Blot sollte eine Bande um 44 kDa in stimulierten menschlichen Zelllinien detektiert werden; fügen Sie sowohl unbehandelte als auch mit Wachstumsfaktoren behandelte positive Kontrollen hinzu, um die Phospho-Abhängigkeit zu bestätigen.
• Bei der Durchführung von IF/ICC optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen und erwägen Sie eine Co-Färbung mit einem Gesamt-MEK2-Antikörper, um Phosphorylierungszustände zu unterscheiden.
• Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht berichtet; Forscher sollten den Antikörper in ihrem Modellsystem validieren, wenn sie nicht-menschliche Proben verwenden.

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