Kaninchen-poliklonaler Antikörper Anti-Phospho-MAPKAPK2 (T334) für WB, ELISA – P49137

Kern-Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von MAPKAPK2 (MK2)

• MAPKAPK2 ist eine stressaktivierte Serin/Threonin-Kinase, die zahlreiche Substrate phosphoryliert, die an der Zytokinproduktion, Endozytose, zytoskelettalen Reorganisation, Zellmigration, DNA-Schadensantwort und transkriptionellen Regulation beteiligt sind.
• Es vermittelt die Phosphorylierung von HSF1, fördert die Interaktion mit HSP90 und hemmt dadurch die HSF1-Homotrimerisierung, DNA-Bindung und Transaktivierung, was die Hitzschockantwort moduliert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:16278218
• In Entzündungssignalwegen reguliert MAPKAPK2 die Produktion von TNF und IL6 posttranskriptionell, indem es AU-reiche Element (ARE)-bindende Proteine ELAVL1, HNRNPA0, PABPC1 und TTP/ZFP36 phosphoryliert und so die Stabilität und Translation von Zytokin-mRNA beeinflusst.
• Die Kinase ist am DNA-Schadensweg beteiligt, indem sie nach genotoxischem Stress vom Zellkern ins Zytoplasma umlagert und HNRNPA0 sowie PARN phosphoryliert. Dies führt zur Stabilisierung von GADD45A-mRNA und trägt zum G2/M-Checkpunkt bei.
• Unter UV-induziertem Stress phosphoryliert MAPKAPK2 CEP131, was dessen Bindung an 14-3-3-Proteine verstärkt und die Bildung neuer zentriolarer Satelliten hemmt, wodurch es mit der Centriol-Biologie verknüpft ist.
  Zugehörige Referenzen: PMID:26616734
• MAPKAPK2 wird in allen menschlichen Geweben exprimiert und liegt sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern vor, wobei seine subzelluläre Verteilung entscheidend für die Funktionsspezifität ist.
• Es wird unter Schlüsselwörtern wie ATP-Bindung, Kinase, Serin/Threonin-Proteinkinase, Phosphoprotein und Ubl-Konjugationsweg klassifiziert, was seine regulatorischen Rollen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper erkennt spezifisch die Phosphorylierung an Threonin 334 (T334) von humanem MAPKAPK2. Um das Phospho-Signal zu detektieren, stimulieren Sie Zellen mit Stressinduktoren (z. B. Anisomycin, UV) und fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren zu den Lysepuffern hinzu.
• Für die Western Blot-Analyse validieren Sie die Spezifität durch Vergleich der Signale mit und ohne Phosphatase-Behandlung oder durch Peptid-Konkurrenz mit dem phosphorylierten versus nicht phosphorylierten Immunogenpeptid.
• Obwohl der Antikörper für WB und ELISA empfohlen wird, sollten Benutzer, die ihn für andere Anwendungen (z. B. IHC, IF) einsetzen, die Bedingungen optimieren und die Kreuzreaktivität mit der Probenart bestätigen.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte kann dieser Antikörper in allen gängigen Modellorganismen verwendet werden; führen Sie jedoch immer geeignete Kontrollen durch, um die Artenreaktivität in Ihrem experimentellen System zu bestätigen.
• Für ELISA-basierte Assays empfehlen wir, die Beschichtungskonzentrationen und Nachweisantikörper zu optimieren, um das beste Signal-Rausch-Verhältnis zu erreichen.
• Wie bei jedem phospho-spezifischen Antikörper können wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen die Affinität verringern; portionieren Sie den Antikörper nach der ersten Verwendung und lagern Sie ihn bei -20°C.

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