Anti-Phospho-MAPKAPK-2/MK2-T334 Kaninchen-polyklonaler Antikörper für IHC-P, ELISA – P49137

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MAPKAPK2

• MAP-Kinase-aktivierte Proteinkinase 2 (MAPKAPK2), auch bekannt als MK2, ist eine stressaktivierte Serin/Threonin-Proteinkinase, die downstream von p38-MAP-Kinase in verschiedenen zellulären Prozessen wirkt: unter anderem Zytokinproduktion, Endozytose, zytoskelettale Reorganisation und Zellzykluskontrolle.
• Aktiviert durch Phosphorylierung durch p38-alpha/MAPK14, hauptsächlich an Threonin 334 (T334), phosphoryliert MAPKAPK2 ein breites Spektrum an Substraten, die an der posttranskriptionellen Regulation von Entzündungsmediatoren, der Funktion von Hitzeschockproteinen und der DNA-Schädenantwort beteiligt sind.
• Phosphoryliert HSF1 und hemmt dessen Transaktivierungsaktivität, indem es die Interaktion mit HSP90-Proteinen fördert und die Homotrimerisierung sowie DNA-Bindung verhindert.
• Verwandte Referenzen: PMID:16278218
• Beteiligt an zellulären Stressantworten, einschließlich der durch ultraviolette Bestrahlung induzierten Signalgebung, wo es CEP131 phosphoryliert, um die Bildung von zentriolaren Satelliten über die Bindung von 14-3-3-Proteinen zu regulieren.
• Verwandte Referenzen: PMID:26616734
• Reguliert posttranskriptionell die Stabilität von TNF- und IL6-mRNA, indem es ARE-bindende Proteine wie ZFP36/TTP, ELAVL1, HNRNPA0 und PABPC1 phosphoryliert und so deren Affinität zu AU-reichen Elementen moduliert.
• Trägt zum DNA-schädeninduzierten G2/M-Checkpunkt bei, indem es vom Kern zum Zytoplasma umlagert und HNRNPA0 sowie PARN phosphoryliert, um die GADD45A-mRNA zu stabilisieren.
• Lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Kern und bewegt sich dynamisch in abhängigkeit von Signalen zwischen den Kompartimenten.
• Wird ubiquitär in allen Geweben exprimiert und gehört zur Unterfamilie der MAPKAP-Kinasen; es weist ATP-bindende und phosphoproteine Eigenschaften auf, alternatives Spleißen wurde beschrieben.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper ist phosphospezifisch für die T334-Stelle; verwenden Sie Phosphataseinhibitoren bei der Probengewinnung und Lyse, um den Phosphorylierungsstatus zu erhalten.
• Für IHC-P schließen Sie geeignete positive und negative Gewebekontrollen ein und erwägen Sie eine Optimierung der Antigenretrieval; validieren Sie die Färbung in relevanten humanen, Maus- oder Rattengeweben.
• Bei ELISA-Anwendungen verwenden Sie sowohl Phosphopeptid- als auch Nichtphosphopeptid-Kontrollen, um die Spezifität zu bestätigen und Kreuzreaktivität mit nicht phosphoryliertem MAPKAPK2 zu vermeiden.
• Da MAPKAPK2 durch mehrere Stressstimuli aktiviert wird, sollten Sie in experimentellen Systemen mit geringer basaler T334-Phosphorylierung die Phosphorylierung vor der Detektion induzieren.

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