Anti-Phospho-MAP2K4 (S257) Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IHC-P - P45985

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MAP2K4-Funktion und -Lokalisierung

• Dual-spezifische mitogenaktivierte Proteinkinase-Kinase 4 (MAP2K4), auch bekannt als JNKK1, MEK4, MKK4, SEK1, SKK1, SERK1, MAPKK4, PRKMK4, SAPKK1.
• Unverzichtbare Komponente des Stress-aktivierten Proteinkinase/c-Jun N-terminalen Kinase (SAP/JNK)-Signalwegs, der JNK1, JNK2 und JNK3 direkt aktiviert.
• Gemeinsam mit MAP2K7 ist MAP2K4 eine von nur zwei Kinasen, die JNKs direkt phosphorylieren und aktivieren; MAP2K4 phosphoryliert bevorzugt die Tyrosin-Residuen im Thr-Pro-Tyr-Motiv, während MAP2K7 das Threonin anvisiert.
• Aktiviert auch p38-MAPKs (MAPK11, MAPK12, MAPK13, MAPK14), was es von MAP2K7 unterscheidet, das ausschließlich JNKs aktiviert.
• Beteiligt an der mitochondrialen Todessignalgebung, fördert die Freisetzung von Cytochrom c und Apoptose.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist vorwiegend zytoplasmatisch, mit gewisser Kernpräsenz.
• Weit verbreitet exprimiert, besonders reichlich in Skelettmuskeln.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung an S257 und anderen Stellen, Acetylierung und Methylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid um S257; es wird erwartet, dass der Antikörper an dieser Stelle phosphoryliertes MAP2K4 erkennt. Für Western Blot wird eine Bande bei ca. 44 kDa erwartet.
• Fügen Sie während der Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten. Validieren Sie die Spezifität durch Wettbewerb mit nicht-phosphoryliertem Peptid oder Phosphatase-Behandlung.
• Für IHC-P und IF/ICC optimieren Sie die Antigen-Rückgewinnung und erwägen Sie die Verwendung phosphospezifischer und Gesamtprotein-Kontrollen, um die Lokalisierung zu bestätigen.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht die Anwendung in Nagetiermodellen; validieren Sie den Antikörper im entsprechenden Gewebe oder Zelllinien-Kontext.
• Für ELISA und IP werden Titrationsexperimente empfohlen, um die optimalen Arbeitskonzentrationen zu ermitteln.

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