Anti-Phospho-LIMK2-T505 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und IF/ICC - P53671

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LIMK2-Funktion und -Lokalisation

• LIMK2 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die stromabwärts von Rho-Familie-GTPasen wirkt und die Dynamik von Aktinfilamenten sowie die Zellmotilität reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:10436159, PMID:11018042
• Sie phosphoryliert TPPP, um die Organisation astraler Mikrotubuli und die Orientierung der mitotischen Spindel während der frühen Mitose zu kontrollieren. Verwandte Referenzen: PMID:22328514
• In vitro phosphoryliert LIMK2 Myelin-Basisprotein und Histon (MBP), was eine breite Substrataktivität demonstriert. Verwandte Referenzen: PMID:8537403
• LIMK2 unterdrückt die Ziliogenese durch Phosphorylierung von CFL1, stört den vesikulären Transport für Zilien und treibt die YAP1/TEAD4-vermittelte transkriptionelle Repression von AURKA und PLK1 an. Verwandte Referenzen: PMID:25849865
• Das Protein enthält LIM- und PDZ-Domänen, was auf Rollen bei Protein-Protein-Interaktionen und als Gerüststruktur hindeutet.
• Lokalisiert im Zytoplasma, Zytoskelett (Spindel und Zentrosom), Zellkern und perinukleären Bereich, was mit seinen vielfältigen Funktionen übereinstimmt.
• Klassifiziert als Transferase und Phosphoprotein mit Metall-bindenden Zinkfingermotiven, was auf seine regulatorische Komplexität hinweist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Um die T505-Phosphorylierung während der Probenvorbereitung zu erhalten, sollten Phosphatase-Inhibitoren in den Lysepuffern enthalten sein und eine längere Probenhandhabung vermieden werden.
• Für den Western Blot ist ein Band bei etwa 72 kDa zu erwarten; verwenden Sie frische Lysate und validieren Sie Ladekontrollen.
• Testen Sie in der Immunfluoreszenz Fixierungsmethoden (z.B. Methanol gegenüber Paraformaldehyd), um die Erhaltung des Phospho-Epitops zu optimieren.
• Überprüfen Sie die Spezifität mit Phosphatase-behandelten Kontrollen oder Peptid-Konkurrenz-Assays, um die phospho-spezifische Bindung zu bestätigen.
• Der Antikörper reagiert mit humanen, murinen und Rattensamples; die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies sollte empirisch getestet werden.
• Da der Antikörper im Kaninchen erzeugt wurde, wählen Sie einen geeigneten Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper für den Nachweis.

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