Anti-Phospho-JNK1-T183/Y185 + JNK2-T183/Y185 + JNK3-T221/Y223 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P45983/P45984/P53779

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: JNK1/2/3 Funktion und Lokalisierung

• Mitglied der Familie der mitogen-aktivierten Proteinkinasen (MAPK), auch bekannt als Stress-aktivierte Proteinkinasen (SAPK), einschließlich JNK1 (MAPK8), JNK2 (MAPK9) und JNK3 (MAPK10).
• Wird durch duale Phosphorylierung an einem Thr-Pro-Tyr-Motiv (T183/Y185 in JNK1) durch upstream-Kinasen MAP2K4/MKK4 und MAP2K7/MKK7 als Reaktion auf Stressreize aktiviert.
• Phosphoryliert und reguliert Transkriptionsfaktoren, insbesondere c-Jun, ATF2 und ELK1, und moduliert dadurch die AP-1-Transkriptionsaktivität. Verwandte Referenzen: PMID:18307971
• Beteiligt an Zellproliferation, Differenzierung, Apoptose und Autophagie durch Zielproteine wie p53/TP53, BAD, BCL2 und BECN1. Verwandte Referenzen: PMID:21364637 PMID:21095239 PMID:18570871
• Subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zellkern und Synapsen; Translokation in den Zellkern erfolgt nach Aktivierung.
• Trägt zur Entzündungssignalgebung bei, indem es NLRP3 phosphoryliert und die Inflammasom-Zusammensetzung fördert. Verwandte Referenzen: PMID:28943315
• Reguliert den zirkadianen Rhythmus durch Phosphorylierung des CLOCK-BMAL1-Heterodimers. Verwandte Referenzen: PMID:22441692
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen (z.B. JNK1 alpha und beta) mit unterschiedlichen Substratbindungspräferenzen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper phosphorylierungsabhängige Epitope erkennt, behandeln Sie Proben während der Lyse mit Phosphatase-Inhibitoren und vermeiden Sie längere Lagerung bei Raumtemperatur, um Phospho-Signale zu erhalten.
• Für Western Blot erwarten Sie Banden bei etwa 48-52 kDa, die JNK1/2 entsprechen; zusätzliche Banden für JNK3 können bei ähnlichen Molekulargewichten beobachtet werden; verwenden Sie positive Kontrollen wie UV- oder Anisomycin-behandelte Zellen.
• Für Immunpräzipitation (IF-P) sind Permeabilisierung und Blockierschritte entscheidend; validieren Sie die Färbung in relevanten stressstimulierten Zelllinien.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) sollten Sie eine Antigen-Retrieval mit Citratpuffer (pH 6.0) in Betracht ziehen und Antikörperverdünnungen in Geweben testen, von denen bekannt ist, dass sie JNK-Aktivierung aufweisen, wie z.B. unter entzündlichen oder apoptotischen Bedingungen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; die Kreuzreaktivität mit nicht-phosphorylierten JNK-Proteinen sollte mit geeigneten Peptid-Konkurrenz-Assays bewertet werden.

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