Anti-Phospho-JAK2 (Y1007/1008) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - O60674

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: JAK2-Funktion und -Lokalisierung

• Tyrosin-Proteinkinase JAK2 (Januskinase 2) ist eine nicht-rezeptorgebundene Proteintyrosinkinase, die eine zentrale Rolle in der Zytokinrezeptor-Signalisierung spielt.
• Sie phosphoryliert Typ-I-Rezeptoren (wie GHR, PRLR, EPOR) und Typ-II-Rezeptoren (wie IFN-Rezeptoren) und schafft so Phosphotyrosin-Dockingstellen für downstream-Signalmoleküle (PMID:15690087, PMID:15899890, PMID:7615558). Verwandte Referenzen: PMID:15690087 PMID:15899890 PMID:7615558
• Nach der Ligandenbindung phosphoryliert JAK2 auch STAT-Proteine (z. B. STAT5, STAT3), sobald diese an den Rezeptor rekrutiert wurden, was zu ihrer Dimerisierung und nukleären Translokation führt, um die Gen-Transkription zu aktivieren (PMID:15690087, PMID:9618263). Verwandte Referenzen: PMID:15690087 PMID:9618263
• Bei der Erythropoese löst Erythropoietin (EPO)-Stimulation die JAK2-Autophosphorylierung, die Assoziation mit dem EPOR und die anschließende Rekrutierung und Phosphorylierung von STAT5 aus, was die Transkription von für die Entwicklung roter Blutkörperchen essentiellen Genen antreibt (PMID:9657743). Verwandte Referenzen: PMID:9657743
• JAK2 vermittelt die Chromatinregulation durch direkte Phosphorylierung von Histon H3 an Tyrosin 41 (H3Y41ph), eine Modifikation, die das Heterochromatin-Protein HP1α (CBX5) vom Chromatin ausschließt und dadurch die Genexpression moduliert (PMID:19783980). Verwandte Referenzen: PMID:19783980
• JAK2 ist in den meisten Geweben ubiquitär exprimiert, was seine pleiotropen Rollen in Wachstum, Entwicklung und Immunität unterstützt.
• Subzellulär lokalisiert sich JAK2 im Zytoplasma, im Kern und im Endomembransystem, was sowohl membranproximale Signalisierung als auch direkte nukleäre Aktionen ermöglicht.
• Sie ist als Tyrosin-Proteinkinase, Phosphoprotein und Proto-Onkogen klassifiziert, verfügt über eine SH2-Domäne und ist in die angeborene und adaptive Immunität, chromosomale Umordnungen und Krankheiten involviert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen für diesen Antikörper ist ein synthetisches Phosphopeptid, das die Y1001- und Y1008-Reste von menschlichem JAK2 umfasst, die für die Kinaseaktivierung kritisch sind. Dieser Antikörper ist darauf ausgelegt, nur die phosphorylierte (aktive) Form von JAK2 zu detektieren.
• Beim Western Blotting wird ein spezifisches Band bei ~131 kDa erwartet. Um die Phospho-Spezifität zu bestätigen, sollten Sie Proben mit Lambda-Phosphatase behandeln oder JAK2-Kinaseinhibitoren als Kontrollen verwenden.
• Für IHC-P können optimale Ergebnisse eine Antigen-Retrieval und die Titration des Primärantikörpers erfordern; fügen Sie positive und negative Kontrollgewebe ein, von denen bekannt ist, dass sie eine aktive JAK2-Signalisierung aufweisen.
• In ELISA kann dieser Antikörper als Detektionskomponente dienen, wenn er mit einem Capture-Antikörper gepaart wird, der das gesamte JAK2 oder ein anderes Epitop erkennt.
• Angesichts der breiten Rolle von JAK2 in der Zytokin-Signalisierung sollten Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen experimentellen System validieren, da der Aktivierungsstatus je nach Zelltyp und Behandlung variieren kann.

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