Anti-Phospho-IRF3-S396 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q14653

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IRF3-Funktion und -Lokalisierung

• Interferon-regulatorischer Faktor 3 (IRF3) ist ein wichtiger transkriptioneller Regulator von Typ-I-Interferon (IFN)-abhängigen Immunantworten, essentiell für die angeborene Abwehr gegen DNA- und RNA-Viren.
• Bei Virusinfektion oder Toll-like-Rezeptor (TLR)-Signalgebung wird IRF3 durch IKBKE- und TBK1-Kinasen phosphoryliert, was Dimerisierung, Kern-Translokation und Assoziation mit CREBBP fördert, um den dsRNA-aktivierten Faktor 1 (DRAF1)-Komplex zu bilden, der die IFN-alpha/beta- und ISG-Transkription aktiviert.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:22394562
  PMID:25636800
  PMID:27302953
  PMID:16154084
  PMID:33440148
• Er bindet an Interferon-stimulierte Response-Elemente (ISRE) in Genpromotoren, wirkt als potenterer Aktivator von IFNB als von IFNA und trägt sowohl zu frühen als auch späten IFN-Induktionsphasen bei.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:11846977
  PMID:16846591
  PMID:16979567
  PMID:20049431
• Als Reaktion auf eine Sendai-Virusinfektion wird IRF3 über TOMM70:HSP90AA1 zu Mitochondrien rekrutiert, wo es in primären Makrophagen Apoptose durch BAX-Aktivierung auslöst.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:25609812
• IRF3 ist ein entscheidender Mediator der IFN-Antwort während einer SARS-CoV-2-Infektion, was seine Rolle in der antiviralen Abwehr gegen neu auftretende Pathogene unterstreicht.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:33440148
• Subzellulär lokalisiert IRF3 in seinem inaktiven Zustand überwiegend im Zytoplasma, translokiert nach Aktivierung in den Zellkern und assoziiert auch mit Mitochondrien, um Apoptose zu regulieren.
• Er wird konstitutiv in einem breiten Spektrum von Geweben exprimiert, was seine grundlegende Rolle bei der angeborenen Immunüberwachung unterstreicht.
• Das Protein unterliegt multiplen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Stabilität streng kontrollieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting ist ein Band bei etwa 47kDa zu erwarten. Validieren Sie die Phospho-Spezifität durch Behandlung von Proben mit Lambda-Phosphatase oder Verwendung einer nicht-phosphorylierten Peptid-Blockierungskontrolle.
• In IF/ICC-Experimenten können Stimuli wie Poly(I:C) oder Virusinfektion verwendet werden, um die Kern-Translokation von IRF3 zu induzieren und den Nachweis der phosphorylierten Form zu verstärken.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit murinem IRF3; erwägen Sie daher für funktionelle Studien die Verwendung von Maus-Zelllinien oder primären Zellen, die mit geeigneten TLR-Agonisten behandelt wurden.
• Für ELISA optimieren Sie die Konzentrationen des Beschichtungsantigens und die Verdünnungen des sekundären Antikörpers, um die Spezifität gegen das phosphorylierte S396-Epitop sicherzustellen.

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