Anti-Phospho-IRAK4 (Thr345/Ser346) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q9NWZ3

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: IRAK4-Funktion und -Lokalisierung

• IRAK4 (Interleukin-1-Rezeptor-assoziierter Kinase 4), auch bekannt als Nierenkarzinom-Antigen NY-REN-64, ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die für die angeborenen Immunantworten entscheidend ist.
• Sie fungiert in den Signalwegen von Toll-like-Rezeptoren (TLR) und Interleukin-1-Rezeptoren (IL-1R) und wird nach Rezeptoraktivierung schnell von MYD88 rekrutiert, um den Myddosom-Komplex zu bilden. Verwandte Referenzen: PMID:17878374
• IRAK4 phosphoryliert IRAK1, stimuliert dessen Kinaseaktivität und Autophosphorylierung, und phosphoryliert auch Pellino-E3-Ubiquitin-Ligasen (PELI1-3), um die Polyubiquitinierung von IRAK1 zu fördern, was zur Aktivierung von NF-kB führt.
• Alternativ phosphoryliert IRAK4 TIRAP, um dessen Ubiquitinierung und Abbau zu fördern und die Signalgebung zu modulieren.
• IRAK4 ist im Zytoplasma lokalisiert und ist ein Phosphoprotein; die Phosphorylierung an den Resten Thr345 und Ser346 (Ziel dieses Antikörpers) ist für seine Kinasefunktion wichtig.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Acetylierung; das Protein unterliegt auch alternativem Spleißen.
• Krankheitsassoziierte Varianten von IRAK4 sind mit Immundefekten verbunden, was seine Rolle bei der Abwehr des Wirts unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot verwenden Sie ein phosphospezifisches Protokoll mit geeigneten Blockierungspuffern und erwägen Sie die Verwendung von Phosphatase-Inhibitor-Cocktails während der Probenvorbereitung, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität, indem Sie Lysate mit Lambda-Phosphatase behandeln; das Verschwinden des Bandes bestätigt die Phosphospezifität.
• Für ELISA beschichten Sie Platten mit dem Phosphopeptid-Immunogen oder Ganzzell-Lysaten aus stimulierten Zellen und optimieren Sie die Konzentrationen.
• Dieser Antikörper ist für menschliche Proben validiert; die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies sollte unabhängig getestet werden.
• Da es sich um einen kaninchenpolyklonalen Antikörper handelt, verwenden Sie einen anti-Kaninchen-HRP-konjugierten Sekundärantikörper für die Detektion.

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