Anti-Phospho-INSR-Y1150/IGF1R-Y1135 Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P06213 / P08069

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von INSR und IGF1R

• INSR ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die die pleiotropen metabolischen und wachstumsfördernden Wirkungen von Insulin durch Aktivierung der PI3K-AKT- und Ras-MAPK-Signalkaskaden vermittelt.
• Insulininduzierte Phosphorylierung von IRS-Proteinen führt zur Aktivierung des PI3K-AKT-Signalwegs, was die Translokation von Glukosetransportern, Anti-Apoptose und die Regulation von gluconeogenen/lipogenen Enzymen fördert.
• Der Ras-MAPK-Signalweg, der durch Rekrutierung von GRB2/SOS zu phosphoryliertem IRS1 ausgelöst wird, steuert Zellwachstum, Überleben und Differenzierung.
• INSR bindet auch IGF1 und IGF2 und kann mit IGF1R Hybridrezeptoren bilden; diese Hybridrezeptoren weisen abhängig von der Isoformzusammensetzung unterschiedliche Ligandenaffinitäten auf.
  Verwandte Referenzen: PMID:12138094 PMID:16831875
• INSR wird überwiegend in insulinempfindlichen Geweben (Leber, Fettgewebe, Skelettmuskulatur) exprimiert und ist in Brust-, Dickdarm-, Lungen-, Eierstock- und Schilddrüsenkarzinomen überexprimiert.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst die Zellmembran, späte Endosomen und Lysosomen, wobei der Rezeptortrafficking die Signaldauer und -spezifität moduliert.
• Der Antikörper erkennt spezifisch die Phosphorylierung an Y1150 (INSR) und Y1135 (IGF1R) innerhalb der Kinase-Aktivierungsschleife, eine Modifikation, die für die volle Rezeptorkinaseaktivität essenziell ist.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Y1150 von menschlichem INSR/IGF1R; dieses Design zielt spezifisch auf die Phosphorylierungsstelle der Aktivierungsschleife ab.
• Für das Western Blotting sollten Sie Ganzzelllysate aus insulinstimulierten menschlichen, murinen oder Ratten-Zelllinien verwenden; erwarten Sie eine Bande bei etwa 154–156 kDa.
• Verwenden Sie bei ELISA-Anwendungen ein phosphoryliertes Peptid als Beschichtungsantigen und schließen Sie eine Nicht-Phosphopeptid-Kontrolle ein, um die Phosphospezifität zu bestätigen.
• Fügen Sie bei der Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren hinzu und optimieren Sie die Zellstimulationsbedingungen, um die Phosphorylierungssignale zu erhalten.

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