Anti-Phospho-IκBα (Ser32) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P25963

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IκBα-Funktion und -Lokalisierung

• Der NF-κB-Inhibitor Alpha (IκBα) ist ein Schlüsselregulator der NF-κB-Transkriptionsfaktoren, kodiert durch das NFKBIA-Gen. Er ist auch bekannt als I-kappa-B-alpha-alpha, IkB-alpha und MAD3.
• IκBα funktioniert durch Bindung an NF-κB-Dimere (wie RELA/p65 und NFKB1/p50) im Zytoplasma, wobei er ihre nukleären Lokalisierungssignale maskiert und den nukleären Transport verhindert. Verwandte Referenzen: PMID:1493333, PMID:36651806, PMID:7479976
• Bei proinflammatorischer oder immunologischer Stimulation unterliegt IκBα einer Phosphorylierung an den Serinresten 32 und 36, was zur Ubiquitinierung und proteasomalen Degradation führt, wodurch NF-κB freigesetzt wird, um in den Kern zu translozieren und die Transkription zu aktivieren. Verwandte Referenzen: PMID:7479976, PMID:7628694, PMID:7796813
• IκBα lokalisiert predominantly im Zytoplasma, kann aber in den Kern shuttle, wo es auch die NF-κB-DNA-Bindung hemmen oder die Beendigung der NF-κB-Antwort vermitteln kann.
• Die Phosphorylierung an Ser32 ist ein kritisches Ereignis im kanonischen NF-κB-Signalweg und macht es zu einem weit untersuchten Biomarker für die Wegaktivierung.
• Schlüsselwörter von UniProt deuten darauf hin, dass IκBα ein Phosphoprotein ist, einer Ubiquitinierung unterliegt und an Wirt-Virus-Interaktionen beteiligt ist, was seine zentrale Rolle in der Immunsignalisierung und Krankheit hervorhebt.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von ca. 35,6 kDa (berechnet) und enthält Ankyrin-Wiederholungsdomänen, die die Wechselwirkungen mit NF-κB vermitteln.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid rund um Ser32 von humanem IκBα; daher erkennt der Antikörper spezifisch die phosphorylierte Form. Fügen Sie während der Probenvorbereitung für Western Blots immer Phosphatase-Inhibitoren hinzu, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz zur Quantifizierung von Phospho-IκBα in Zell- oder Gewebelysaten verwendet werden; erwägen Sie die Kombination mit einem Gesamt-IκBα-Antikörper zur Normalisierung.
• Bestätigen Sie die Antikörperspezifität in Ihrem System, indem Sie Proben mit Lambda-Phosphatase behandeln oder ein nicht-phosphoryliertes Peptid als Wettbewerber verwenden.
• Eine Kreuzreaktivität wird für Mensch, Maus und Ratte berichtet. Validieren Sie die Reaktivitäten in den relevanten Spezies vor großangelegten Experimenten, da die Epitopkonservierung variieren kann.

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