Anti-Phospho-HSL-S853 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB - Q05469

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Hormon-sensitiven Lipase

• Die Hormon-sensitive Lipase (HSL) ist eine Lipase mit breiter Spezifität, die die Hydrolyse von Triacylglycerolen (TAGs), Diacylglycerolen (DAGs), Monoacylglycerolen (MAGs), Cholesterinestern und Retinylestern katalysiert. Sie zeigt eine bevorzugte Hydrolyse von DAGs gegenüber TAGs und MAGs und spaltet bevorzugt Fettsäureester an der sn-3-Position von DAGs (PubMed:15716583, PubMed:15955102, PubMed:19800417). Verwandte Referenzen: PMID:15716583 PMID:15955102 PMID:19800417
• Im Fettgewebe und Herz hydrolysiert HSL hauptsächlich gespeicherte Triglyceride, um freie Fettsäuren freizusetzen, während sie in steroidogenen Geweben Cholesterinester in freies Cholesterin für die Produktion von Steroidhormonen umwandelt.
• Das Protein, kodiert durch das LIPE-Gen, ist auch als Monoacylglycerol-Lipase LIPE, Retinylester-Hydrolase (REH) bekannt und steht im Zusammenhang mit Stoffwechselstörungen wie Diabetes und Fettleibigkeit.
• HSL lokalisiert in mehreren zellulären Kompartimenten, einschließlich der Zellmembran, Caveolae, Zytosol und Lipidtröpfchen, was mit ihrer Rolle bei der Lipidmobilisierung übereinstimmt.
• Die Phosphorylierung an Serin 853 (S853) ist eine wichtige regulatorische Modifikation, die die enzymatische Aktivität und subzelluläre Lokalisierung von HSL moduliert; das Protein wird als Phosphoprotein klassifiziert, das am Lipidabbau und Cholesterin-/Steroidstoffwechsel beteiligt ist.
• Die Gewebeexpression ist im Hoden am höchsten, mit zusätzlichem Vorkommen in Fett-, Herz- und steroidogenen Geweben, was ihre gewebespezifischen metabolischen Funktionen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid hergestellt, das phosphoryliertem Serin 853 von humanem HSL entspricht; er erkennt spezifisch die phosphorylierte Form von HSL und sollte das nicht-phosphorylierte Protein nicht detektieren.
• Für Western Blotting verwenden Sie Lysepuffer, die Phosphatase-Inhibitoren enthalten, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten. HSL läuft bei etwa 117 kDa; optimieren Sie die Antikörperverdünnung basierend auf Ihrem Probentyp und Nachweissystem.
• Kreuzreaktivität mit Maus ist bestätigt; daher kann der Antikörper für Mausgewebe- oder Zelllysate verwendet werden. Validieren Sie die Spezifität in Ihrem relevanten biologischen Kontext, wie z.B. lipolytischen oder steroidogenen Geweben.
• Für ELISA sollten eine phospho-spezifische Beschichtungs- oder Nachweisstrategie in Betracht gezogen werden; überprüfen Sie Linearität und Sensitivität mit bekannten phosphorylierten HSL-Standards oder Peptid-Konkurrenz-Assays.

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