Anti-Phospho-HSL-S660 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper - Q05469

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der hormonsensitiven Lipase

• Die hormonsensitive Lipase (HSL), kodiert durch das LIPE-Gen, ist ein multifunktionelles Enzym mit breiter Substratspezifität, das die Hydrolyse von Triacylglycerinen (TAGs), Diacylglycerinen (DAGs), Monoacylglycerinen (MAGs), Cholesterinestern und Retinylestern katalysiert.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:15716583, PMID:15955102, PMID:19800417
• Sie zeigt eine Präferenz für DAGs gegenüber TAGs und MAGs und hydrolysiert bevorzugt Fettsäureester an der sn-3-Position des Glycerinrückgrats in DAGs.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:19800417
• HSL hydrolysiert auch 2-Arachidonoylglycerol (ein Endocannabinoid) und 2-Acetyl-Monoalkylglycerolether, einen Vorläufer für die Synthese des plättchenaktivierenden Faktors.
• In Fettgewebe und Herz mobilisiert HSL hauptsächlich gespeicherte Triglyceride in freie Fettsäuren, während sie in steroidogenen Geweben Cholesterinester in freies Cholesterin für die Produktion von Steroidhormonen umwandelt.
• Das Protein lokalisiert sich in der Zellmembran, Höhlen (Caveolae), dem Zytosol und Lipidtropfen, was seine dynamischen Rollen im Lipidstoffwechsel und in der Signalübertragung widerspiegelt.
• HSL unterliegt einer Phosphorylierung an mehreren Stellen, einschließlich Ser660, was ihre Aktivität und subzelluläre Verteilung reguliert; sie wird als Phosphoprotein klassifiziert.
• Das LIPE-Gen wird alternativ gespleißt und produziert Isoformen mit unterschiedlichen Gewebeverteilungen; im Hoden ist eine ausgeprägte Expression zu beobachten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid erhoben, das dem HSL-Ser660-Phosphorylierungsort entspricht. Für eine phosphospezifische Detektion sollten Sie Proben während der Lyse mit Phosphatasehemmern behandeln und die Spezifität durch eine Phosphatasebehandlung validieren.
• Für Western Blot (WB) wird eine Bande bei ~117 kDa erwartet. Sorgen Sie für eine adäquate Blockierung und Antikörpertitrierung, um unspezifische Bindungen in komplexen Gewebelysaten zu minimieren.
• Verwenden Sie im ELISA ein Phosphopeptid als Positivkontrolle und ein nicht-phosphoryliertes Peptid, um die Spezifität für den Phosphorylierungszustand zu bestätigen.
• Eine Kreuzreaktivität mit menschlicher und muriner HSL wird vorhergesagt; validieren Sie die Leistung im relevanten Speziesmodell vor quantitativen Studien.

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