Anti-Phospho-HSF1-S307 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q00613

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HSF1-Funktion und Lokalisierung

• Heat-Shock-Faktor-Protein 1 (HSF1) ist ein stressinduzierbarer Transkriptionsfaktor, der eine zentrale Rolle in der Hitzeschockantwort spielt, indem er die Expression von molekularen Chaperonen (HSPs) aktiviert, die Zellen vor Schäden schützen. Verwandte Referenzen: PMID:11447121, PMID:12659875, PMID:12917326
• In nicht gestressten Zellen wird HSF1 durch Interaktion mit einem HSP90-haltigen Multichaperon-Komplex in einem inaktiven monomeren Zustand gehalten. Verwandte Referenzen: PMID:11583998, PMID:16278218, PMID:9727490
• Unter Stress homotrimerisiert HSF1 und bindet an Heat-Shock-Elemente (HSEs) in den Promotoren von HSP-Genen, um die Transkription zu initiieren. Verwandte Referenzen: PMID:10359787, PMID:11583998, PMID:12659875
• Die Phosphorylierung an Ser307 ist eine Schlüsselregulierungsmodifikation, die die transkriptionelle Aktivität von HSF1 und die Abschwächung der Stressantwort moduliert.
• HSF1 reguliert auch die prä-mRNA-Verarbeitung, den Kernexport von HSP70-mRNA und spielt eine Rolle bei Mitose, DNA-Reparatur und zellulärer Proliferation. Verwandte Referenzen: PMID:14707147, PMID:17897941, PMID:18794143, PMID:26359349, PMID:26754925
• Die subzelluläre Lokalisierung ist dynamisch: HSF1 findet sich je nach Zellzustand im Zellkern, Zytoplasma, Zentrosom und am Kinetochor.
• HSF1 ist an der Reaktivierung von latentem HIV-1 beteiligt, indem es an den viralen LTR-Promotor bindet und transkriptionelle Elongationsfaktoren rekrutiert.
• HSF1 unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper auf die Phosphorylierungsstelle Ser307 abzielt, sollten Sie die Phospho-Spezifität durch einen Peptidkompetitionsassay oder durch Behandlung von Zellen mit Phosphataseinhibitoren überprüfen.
• Für WB ist eine Bande bei etwa 57 kDa zu erwarten. Verwenden Sie hitzegeschockte humane Zelllysate (z.B. HeLa oder Jurkat) als positive Kontrollen; schließen Sie unbehandelte Kontrollen ein, um die stressinduzierbare Phosphorylierung zu bestätigen.
• ELISA: geeignet zum Nachweis von Phospho-HSF1-S307 in humanen Proben. Erwägen Sie für einen Sandwich-ELISA die Verwendung eines Capture-Antikörpers gegen Gesamt-HSF1 und den Nachweis mit diesem phospho-spezifischen Antikörper.
• Verdünnungsmittel und Blockierungspuffer sollten empirisch optimiert werden; für phospho-spezifische Antikörper wird im Allgemeinen BSA gegenüber Milch bevorzugt.

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