Anti-Phospho-Histon H3.3-T3 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q16695 / P68431

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3.1t

• Histon H3.1t (auch bezeichnet als H3/g oder H3.4) ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, das DNA zu Chromatin verpackt und kompaktiert, wodurch die Zugänglichkeit der DNA für zelluläre Grundprozesse wie Transkription, Replikation und Reparatur eingeschränkt wird.
• Nukleosomen spielen eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität, indem sie die Zugänglichkeit der DNA durch eine komplexe Reihe von posttranslationalen Modifikationen – gemeinsam als Histon-Code bezeichnet – und Nukleosomen-Remodellierung modulieren.
• H3.1t ist ein Mitglied der Histon H3-Familie und wird spezifisch in Hoden exprimieren, was auf eine spezialisierte Funktion bei der Chromatinorganisation während der Spermatogenese hindeutet.
• Das Protein lokalisiert ausschließlich im Kern und auf Chromosomen, wo es zur strukturellen Erhaltung und dynamischen Regulation von Chromatin beiträgt.
• Histon H3.1t unterliegt zahlreichen posttranslationalen Modifikationen, darunter Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung, ADP-Ribosylierung, Hydroxylierung und Ubiquitinierung, die gemeinsam die Chromatindynamik und epigenetische Kontrolle orchestrieren.
• UniProt-Schlüsselwörter heben seine Beteiligung an der Bildung des Nukleosomenkerns, DNA-Bindung und einer breiten Palette von Modifikationen hervor, was seine zentrale Rolle bei der epigenetischen Regulation und Genomstabilität unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das die T3-Phosphorylierungsstelle von menschlichem Histon H3.3 (UniProt P84243) umfasst; basierend auf Sequenzhomologie wird eine breite Kreuzreaktivität mit anderen H3-Varianten vorausgesagt.
• Verwenden Sie für das Western Blotting während der gesamten Lyse und Probenvorbereitung Phosphataseinhibitoren, um das Phospho-Thr3-Epitop zu erhalten. Die erwartete wandernde Bande entspricht ~15 kDa.
• Um die Antikörperspezifität zu bestätigen, erwägen Sie Peptid-Wettbewerbsassays mit phosphorylierten gegenüber nicht-phosphorylierten Peptiden oder eine Behandlung der Proben mit Lambda-Proteinphosphatase vor der Detektion.
• Optimieren Sie bei ELISA-Anwendungen die Beschichtungsbedingungen für das phosphorylierte Antigen und schließen Sie strenge Kontrollen für unspezifische Bindung und Matrixeffekte ein.

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