Anti-Phospho-Histon H3.3 (Ser31) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P84243

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H3.3 Funktion und Lokalisierung

• Histon H3.3 ist eine Histonvariante, die konventionelles H3 in einer Vielzahl von Nukleosomen in aktiven Genen ersetzt und die vorherrschende H3-Form in sich nicht teilenden Zellen darstellt.
• Im Gegensatz zu kanonischen Histonen wird H3.3 unabhängig von der DNA-Synthese in Chromatin eingebaut, markiert transkriptionell aktive Regionen und bewahrt einen epigenetischen Abdruck.
• Nukleosomen, die H3.3 enthalten, spielen eine zentrale Rolle bei der Regulierung der DNA-Zugänglichkeit und beeinflussen Transkription, DNA-Reparatur, Replikation und chromosomale Stabilität.
• H3.3 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung, Methylierung und Phosphorylierung, die den Histoncode bilden und die Chromatinstruktur sowie Genexpression modulieren.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist auf den Zellkern beschränkt, wo H3.3 ein integraler Bestandteil der Chromosomen ist.
• Das H3.3-Protein wird von zwei Genen kodiert, H3-3A (H3F3A) und H3-3B (H3F3B), die beide identische reife Histonproteine produzieren.
• Mutationen in H3.3-Genen wurden mit geistiger Behinderung und anderen Krankheitsphänotypen in Verbindung gebracht, was ihre kritische Rolle in der Neuroentwicklung unterstreicht.
• Die Phosphorylierung an Serin 31 (S31) ist eine der dynamischen Modifikationen von H3.3, und die funktionellen Konsequenzen werden aktiv erforscht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Resten um Ser31 von humanem H3.3 entspricht; der Antikörper sollte spezifisch die phosphorylierte Form erkennen, nicht das unmodifizierte Protein.
• Für Western Blotting wird eine Bande bei etwa 15 kDa erwartet. Phosphataseinhibitoren sollten in Lysepuffern enthalten sein, um Phosphorylierungssignale zu erhalten.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) an Paraffinschnitten müssen die Antigen-Retrieval-Bedingungen möglicherweise optimiert werden; Zitrat- oder EDTA-basierte Methoden sollten in Betracht gezogen werden.
• Die vorhergesagte breite Kreuzreaktivität deutet auf eine potenzielle Anwendbarkeit in anderen Spezies hin; vor einem großflächigen Einsatz im gewünschten Modellsystem validieren.
• ELISA kann für den quantitativen Nachweis eingesetzt werden; mit geeigneten Sekundärantikörpern und Kontrollen kombinieren.

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