Anti-Phospho-Histon H3-T45 Kaninchen-poliklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – Q16695 / P68431

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Histon-H3-Phosphorylierung an Thr45

• Histon H3 ist ein Kernhiston-Bestandteil des Nukleosoms, essenziell für die Kompaktierung von DNA zu Chromatin. Es spielt eine Schlüsselrolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, Replikation und chromosomalen Stabilität, wobei die DNA-Zugänglichkeit durch posttranslationale Modifikationen (Histon-Code) moduliert wird.
• Dieses Produkt erkennt an Thr45 (T45) phosphoryliertes H3; das Ziel umfasst die hodenspezifische Isoform Histon H3.1t (H3/g, H3.4), kodiert vom H3-4 Gen, sowie die kanonischen replikationsabhängigen Histon-H3.1-Isoformen.
• Die H3-Genfamilie umfasst zahlreiche intronlose Gene, die identische oder sehr ähnliche H3-Proteine codieren, wobei die Kernvariante H3.1 die am häufigsten vorkommende ist. Die Phosphorylierungsstelle Thr45 ist über alle H3-Isoformen hinweg konserviert.
• Subzellulär lokalisiert sich H3 im Zellkern und assoziiert mit Chromosomen – was mit seiner Rolle für die Chromatinarchitektur während des gesamten Zellzyklus übereinstimmt.
• H3 unterliegt zahlreichen posttranslationalen Modifikationen: Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung und Ubiquitinierung, die gemeinsam unterschiedliche Chromatinzustände etablieren. Die Phosphorylierung an Thr45 ist an Ereignissen der Chromatinremodellierung beteiligt.
• Die gewebsspezifische Expression von H3.1t ist in Hodenzellen angereichert, aber aufgrund der hohen Sequenzhomologie erkennt dieser phosphospezifische Antikörper auch H3.1 und andere kanonische H3-Proteine über ein breites Spektrum an Spezies und Geweben hinweg.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Position Thr45; für optimale Phosphospezifität empfehlen wir eine Validierung mit Nicht-Phosphopeptid-Konkurrenzassays oder Phosphatasebehandlung in Ihrem Probensystem.
• Für Western Blot (WB), Immunpräzipitation (IP), Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) müssen die Verdünnungen für jeden Assay und Gewebetyp optimiert werden.
• Aufgrund der Konservierung der T45-Phosphorylierungsstelle wird Kreuzreaktivität mit anderen Spezies vorausgesagt. Überprüfen Sie die Detektion in Ihrer Zielspezies und verwenden Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. mitotische Zelllysate für Phosphorylierung).
• Für ELISA-Anwendungen stellen Sie sicher, dass die Peptidbeschichtung korrekt erfolgt, um die Erkennung des Phospho-Epitops zu erhalten.

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