Anti-Phospho-Histon H3-S28 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q16695 / P68431

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3 (Phospho-S28)

• Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, der Grundeinheit des Chromatins, und spielt eine zentrale Rolle bei der Kompaktierung von DNA und der Regulation der DNA-Zugänglichkeit.
• Es existieren mehrere H3-Varianten; Q16695 kodiert für testisspezifisches Histon H3.1t (auch bekannt als H3/g, H3.4), aber das Produkt kann aufgrund der hohen Sequenzkonservierung andere H3-Varianten einschließlich H3.1 (P68431) erkennen.
• Als Teil des Nukleosoms trägt H3 zu essentiellen Kernprozessen wie Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomaler Stabilität bei.
• Histon H3 unterliegt einer komplexen Vielfalt posttranslationaler Modifikationen (PTMs), die gemeinsam als Histon-Code bezeichnet werden und die Chromatinstruktur und -funktion modulieren. Wichtige PTMs umfassen Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Ubiquitinierung und andere.
• Die Phosphorylierung an Serin 28 (S28) ist Teil des Histon-Codes und wird mit der Chromatindynamik in Verbindung gebracht, wobei sie Mitose und Genaktivierung beeinflusst.
• Die subzelluläre Lokalisation ist auf den Kern beschränkt und assoziiert mit Chromosomen, was mit seiner Funktion an gebundenem Chromatin übereinstimmt.
• H3.1t zeigt gewebespezifische Expression in Hodenzellen, was auf spezialisierte Funktionen bei der Spermatogenese oder Chromatinremodellierung während der Keimzellentwicklung hindeutet.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um S28 hergestellt; daher wird erwartet, dass er spezifisch die phosphorylierte Form von Histon H3 erkennt. Um die Phosphorylierung während der Probenvorbereitung zu erhalten, fügen Sie Ihren Lysepuffern Phosphataseinhibitoren hinzu.
• Für das Western Blotting (WB) beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht ~15 kDa, und es sollte eine scharfe Bande beobachtet werden. Erwägen Sie die Verwendung von Kernextrakten oder säureextrahierten Histonen für eine angereicherte Detektion.
• In der Immunpräzipitation (IP) bietet das Kaninchen-monoklonale Format hohe Affinität und Spezifität; validieren Sie Bindungs- und Elutionsbedingungen empirisch in Ihrer Zielprobe.
• Für ELISA kann das phosphorylierte Peptid als Positivkontrolle verwendet werden; optimieren Sie Beschichtungs- und Detektionsbedingungen, um Kreuzreaktivität mit nicht phosphorylierten Peptiden zu minimieren.
• Kreuzreaktivität wird für ein breites Spektrum an Arten basierend auf Sequenzkonservierung vorausgesagt; überprüfen Sie dies jedoch immer mit geeigneten artspezifischen Kontrollen.

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