Anti-Phospho-Histon H2A-S129 Kaninchen pAb - P04911

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H2A.1 Funktion und Lokalisierung

• Histon H2A.1 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, der grundlegenden Wiederholungseinheit des Chromatins. Nukleosome wickeln und verdichten DNA und regulieren so die DNA-Zugänglichkeit für Transkription, Replikation, Reparatur und chromosomale Stabilität.
• Dieses Histon ist entscheidend an der DNA-Schadensantwort beteiligt, insbesondere an der Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen (DSBs) über homologe Rekombination und nicht-homologe Endverknüpfungswege.
• Posttranslationale Modifikationen von Histon H2A.1, wie Phosphorylierung an Ser129 (äquivalent zum Säugetier-H2AX S139), Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, bilden einen Histoncode, der die Chromatinstruktur moduliert und Reparaturproteine an Schadensstellen rekrutiert.
• Das Protein ist ausschließlich im Zellkern lokalisiert und während des gesamten Zellzyklus mit Chromosomen assoziiert.
• S. cerevisiae Histon H2A.1 wird durch das HTA1-Gen kodiert und gehört zur H2A-Histonfamilie, die hochkonservierte Varianten in Eukaryoten umfasst.
• Mit P04911 assoziierte Schlüsselwörter umfassen DNA-Schaden, DNA-Reparatur, Phosphoprotein, Nukleosomkern und Ubl-Konjugation, was seine Schlüsselrolle bei der Genomerhaltung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das phosphoryliertem Ser129 von Hefe-Histon H2A entspricht. Daher erkennt der Antikörper spezifisch die phosphorylierte Form; stellen Sie sicher, dass die experimentellen Bedingungen den Phosphorylierungsstatus erhalten (z. B. Einsatz von Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung).
• Für IHC-P sollten Antigen-Retrieval-Methoden und Gewebefixierungsprotokolle für phosphorylierte Epitope optimiert werden. Erwägen Sie die Testung von Citraconsäureanhydrid oder hitzeinduziertem Epitop-Retrieval in Citratpuffer (pH 6.0), wenn Standardmethoden eine schwache Färbung ergeben.
• In ELISA kann der Antikörper zum Nachweis von phosphorylierten H2A-Peptiden oder -Proteinen verwendet werden. Überprüfen Sie die Kreuzreaktivität mit dem endogenen Ziel in der relevanten Spezies (Mensch, Ratte) durch Einbeziehung geeigneter Kontrollen und Blockierung mit nicht-phosphorylierten Peptiden.
• Obwohl das Immunogen aus Hefe stammt, wird Kreuzreaktivität für Mensch und Ratte berichtet. Sequenzvergleiche zeigen jedoch, dass die Region um Ser129 in höheren Eukaryoten hochkonserviert ist; dennoch wird eine Validierung im spezifischen Probensystem empfohlen.

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