Anti-Phospho-HER2/ErbB2 (Y1221/1222) Kaninchen-Polyclonalkörper für WB, ELISA - P04626

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HER2/ErbB2

• Die Rezeptor-Tyrosin-Proteinkinase erbB-2, auch bekannt als HER2, NEU oder CD340, wird vom ERBB2-Gen kodiert und fungiert als Zelloberflächenrezeptor, der einen Korezeptor für die Ligandenbindung benötigt und essentielle Neuregulin-Rezeptor-Komplexe bildet.
• HER2 reguliert die Mikrotubuli-Stabilität und das Auswachsen über einen MEMO1-RHOA-DIAPH1-Signalweg, der GSK3B hemmt. Dies ermöglicht die Membranassoziation von APC und MACF1 für die Mikrotubuli-Fixierung.
• Im Zellkern wirkt HER2 als Transkriptionsregulator: Es bindet an den PTGS2/COX-2-Promotor an der Sequenz 5'-TCAAATTC-3' und aktiviert die Transkription. Außerdem ist es an der transkriptionellen Aktivierung von CDKN1A beteiligt, an der STAT3 und SRC beteiligt sind.
• HER2 steigert zudem die Proteinsynthese, indem es die rRNA-Gentranskription durch RNA-Polymerase I fördert, und verbindet so Zelloberflächensignale mit der Ribosomenbiogenese.
• Die Lokalisation umfasst die Zellmembran, Rüschenmembran, frühe Endosomen, das Zytoplasma (perinukleäre Region) und den Zellkern, was seine dynamischen Signalfunktionen widerspiegelt.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Phosphorylierung an mehreren Tyrosinresten (z. B. Y1221/1222), die die Kinaseaktivität und nachgeschaltete Signalwege regulieren, sowie Glykosylierung und Disulfidbindungen.
• Es wird in verschiedenen Tumorgeweben exprimiert, einschließlich primärer Brusttumoren und Karzinomen des Dünndarms, der Speiseröhre, der Niere und des Mundes. Dies unterstreicht seine Rolle als Onkoprotein und therapeutisches Ziel.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Y1221 und Y1222, was bedeutet, dass der Antikörper die doppelt phosphorylierte Form von HER2 spezifisch erkennt. Verwenden Sie Phosphataseinhibitoren bei der Probenaufbereitung, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Für Western Blot (WB) validieren Sie den Antikörper in Zelllinien oder Geweben mit bekannter HER2-Y1221/1222-Phosphorylierung, wie z. B. Heregulin-stimulierten Zellen oder Tumorproben; Eine Bande bei ca. 138 kDa ist zu erwarten.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zum Nachweis oder zur Quantifizierung von phosphoryliertem HER2 in Lysaten oder als Capture-/Detektionsreagenz verwendet werden; Optimieren Sie Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen empirisch.
• Kreuzreaktivität wird nur für die humane Spezies berichtet; Für nicht-menschliche Proben überprüfen Sie die Sequenzhomologie der Phosphopeptidregion vor der Verwendung.

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