Anti-Phospho-HDAC4-S246 + HDAC5-S259 + HDAC9-S220 Kaninchen monoklonaler Antikörper - P56524 / Q9UQL6 / Q9UKV0

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HDAC4/5/9

• Histondeacetylase 4 (HDAC4) ist eine Histondeacetylase der Klasse II, die die Entfernung von Acetylgruppen von Lysinresten an den N-terminalen Schwänzen der Core-Histone (H2A, H2B, H3, H4) katalysiert. Dies führt zur Chromatinverdichtung und epigenetischen Transkriptionsrepression.
• HDAC4 wirkt durch die Bildung großer Multiproteinkomplexe als Transkriptionsrepressor und ist entscheidend an der Zellzyklusprogression und Entwicklungsvorgängen beteiligt.
• Durch direkte Interaktion mit Mitgliedern der Myozyten-Enhancer-Faktor-2 (MEF2)-Familie (MEF2A, MEF2C, MEF2D) spielt HDAC4 eine Schlüsselrolle bei der Muskelreifung und -differenzierung.
• HDAC4 ist an der MTA1-vermittelten epigenetischen Regulation der Expression des Östrogenrezeptors 1 (ESR1) bei Brustkrebs beteiligt und verbindet Deacetylaseaktivität mit der HormonSignalgebung.
• HDAC4 deacetyliert HSPA1A und HSPA1B an Lys-77 und fördert deren bevorzugte Bindung an das Co-Chaperon STUB1 (PubMed:27708256). Zugehörige Referenzen: PMID:27708256
• Das Protein lokalisiert sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma, shuttle zwischen den Kompartimenten als Reaktion auf Phosphorylierungssignale und wird ubiquität in allen Geweben exprimiert.
• HDAC4 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen (Phosphorylierung, Ubiquitinierung) und ist mit neurologischen Entwicklungsstörungen wie Epilepsie und geistiger Behinderung verbunden.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das die S246 von HDAC4, S259 von HDAC5 und S220 von HDAC9 umfasst; die Spezifität des Antikörpers für phosphorylierte Formen sollte durch Phosphatasebehandlung von Lysaten bestätigt werden.
• Für Western Blot können sowohl Kern- als auch Zytoplasmafraktionen aufgrund des HDAC4-Shuttlings Banden ergeben; beobachtete Molekulargewichte können von 57–65 kDa (möglicherweise gespalten/Isoform) bis 97–122 kDa (vollständig) reichen. Validieren Sie mit positiven und negativen Kontrollen.
• Bei IHC-P müssen die Bedingungen für die Antigenrettung gegebenenfalls optimiert werden; erwägen Sie die Verwendung phosphospezifischer Blockierungspeptide zur Bestätigung der Färbung.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-HDAC4/5/9 ist angegeben; bei Verwendung in anderen Spezies sollte jedoch die Sequenzübereinstimmung der Zielphosphorylierungsstellen überprüft werden.

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