Anti-Phospho-GSK3β-S9 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P49841

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GSK3β-Funktion und Lokalisierung

• GSK3β fungiert als konstitutiv aktive Kinase, die die Glykogensynthese, Proteinsynthese und Wnt-Signalübertragung negativ reguliert, indem sie Schlüsselsubstrate wie GYS1, EIF2B und CTNNB1/Beta-Catenin phosphoryliert. Verwandte Referenzen: PMID:11430833, PMID:12554650, PMID:8397507

• Im Wnt-Signalweg bildet GSK3β mit APC und AXIN1 einen Destruktionskomplex, phosphoryliert Beta-Catenin und fördert so dessen Ubiquitin-abhängigen Abbau, wodurch die Expression von Wnt-Zielgenen gehemmt wird. Verwandte Referenzen: PMID:12554650

• GSK3β phosphoryliert MAPT/TAU an Thr-548, was dessen Fähigkeit, Mikrotubuli zu stabilisieren, erheblich verringert, und ist an der Bildung von neurofibrillären Bündeln bei der Alzheimer-Krankheit beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:14690523

• Es ist ein wichtiger Regulator der circadianen Uhr, phosphoryliert und fördert den Abbau der Kernuhrkomponenten BMAL1, CLOCK und PER2. Verwandte Referenzen: PMID:19946213, PMID:28903391

• Das Protein ist überwiegend zytoplasmatisch lokalisiert, kommt aber auch im Zellkern und in der Zellmembran vor.

• GSK3β wird in verschiedenen Geweben exprimiert, einschließlich Hoden, Thymus, Prostata, Eierstöcken und in geringeren Mengen in Lunge, Gehirn und Niere; es kolokalisiert mit PKR und TAU im Gehirn von Alzheimer-Patienten.

• Darüber hinaus phosphoryliert GSK3β JUN (verringert dessen DNA-Affinität), NFATC1 (fördert den Kernexport) und reguliert Apoptose, Insulin-Signalübertragung und neuronale Entwicklung. Verwandte Referenzen: PMID:1846781, PMID:9072970

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches Phospho-Peptid, das den Bereich um Ser9 von humanem GSK3β umgibt. Für Western Blotting wird empfohlen, Phosphatase-Inhibitoren während der Zelllyse einzusetzen und das Molekulargewicht bei etwa 47 kDa zu überprüfen.
• Um die Phospho-Spezifität zu bestätigen, sollten Zelllysate vor der Analyse mit λ-Phosphatase behandelt oder Peptid-Konkurrenz-Assays mit dem Phospho- und dem Nicht-Phospho-Peptid durchgeführt werden.
• Für ELISA sollte sichergestellt werden, dass das plattenbeschichtete Antigen das Phospho-Epitop erhält; eine schonende Beschichtungspufferlösung und optimierte Blockierbedingungen werden empfohlen. Validieren Sie die Signallinearität und den Hintergrund in der relevanten Probenmatrix.

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