Anti-Phospho-FOXO1-T24/FOXO3A-T32/FOXO4-T28 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IFA - Q12778 / O43524 / P98177

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: FOXO1/FOXO3A/FOXO4 Funktion und Lokalisierung

• FOXO1 (Forkhead box O1) ist ein Transkriptionsfaktor und ein Schlüsselmitglied der FOXO-Familie, zu der auch FOXO3A und FOXO4 gehören – alle drei sind Ziele dieses Antikörpers.
• FOXO1 ist der Hauptmediator der Insulinsignalgebung, bindet an das Insulin-Antwort-Element (IRE), um das metabolische Gleichgewicht und das Redox-Gleichgewicht als Reaktion auf oxidativen Stress zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:10358076 PMID:12228231 PMID:15220471
• In Hepatozyten fördert FOXO1 die Gluconeogenese durch Aktivierung von Genen wie G6PC1 und PCK1, wobei es mit Coaktivatoren wie PPARGC1A zusammenarbeitet. Verwandte Referenzen: PMID:17024043
• FOXO1 ist ein kritischer Regulator des programmierten Zelltods, fungiert stromabwärts von Kinasen (z. B. AKT1, STK4) und fördert die Apoptose in Neuronen, kardialen glatten Muskelzellen und Endothelzellen. Verwandte Referenzen: PMID:18356527 PMID:19221179 PMID:19483080 PMID:31063815
• Unter Hunger oder oxidativem Stress induziert FOXO1 Autophagie auf transkriptionsunabhängige Weise. Verwandte Referenzen: PMID:20543840
• FOXO1 wechselt dynamisch zwischen Zytoplasma und Zellkern; seine subzelluläre Lokalisierung und transkriptionelle Aktivität werden streng durch posttranslationale Modifikationen kontrolliert, insbesondere durch Phosphorylierung an Thr‑24 (und analogen Stellen in FOXO3A/FOXO4) durch AKT, was zum Ausschluss aus dem Kern führt.
• FOXO1 ist reichlich in Skelettmuskulatur und Ovarien exprimiert, mit mäßigen Spiegeln in Herz, Plazenta, Lunge, Leber, Bauchspeicheldrüse und anderen Geweben; es wird auch in Endothelzellen nachgewiesen. Verwandte Referenzen: PMID:9479491 PMID:19483080

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid erhoben, das der Thr‑24-Region von humanem FOXO1 entspricht. Basierend auf der Sequenzhomologie wird vorhergesagt, dass er auch das phosphorylierte Thr‑32 von FOXO3A und Thr‑28 von FOXO4 erkennt.
• Für die Western-Blot-Analyse fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren zum Lysepuffer hinzu, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten. Eine Bande in der Nähe von 70 kDa wird für FOXO1 erwartet, mit ähnlichen Größen für FOXO3A und FOXO4.
• Bei der Durchführung der Immunhistochemie (IHC‑P) sollten Sie die Färbung in Geweben validieren, die bekanntermaßen FOXO1 exprimieren (z. B. Skelettmuskel, Leber), und eine dephosphorylierte Kontrolle verwenden, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• ELISA-Anwendungen können davon profitieren, das Immunogen-Peptid als Positivkontrolle zu verwenden, um die Empfindlichkeit der Detektion zu bewerten.
• Wie bei allen phospho-spezifischen Antikörpern kann die Vorabsorption des Antikörpers mit dem nicht-phosphorylierten Peptid verwendet werden, um die Spezifität zu verifizieren.

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