Anti-Phospho-FLT3-Y589/591 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, ELISA - P36888

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von FLT3

• FLT3 (Fms-ähnliche Tyrosinkinase 3), auch bezeichnet als FLK2, STK1 und CD135, ist eine rezeptortyrosinproteinkinase, die an FLT3LG bindet, um Differenzierung, Proliferation und Überleben von hämatopoetischen Vorläuferzellen und dendritischen Zellen zu regulieren.
• Die nachgeschaltete Signalübertragung umfasst die Phosphorylierung von SHC1 und AKT1, die Aktivierung von MTOR, der RAS/MAPK-Kaskade (MAPK1/ERK2, MAPK3/ERK1) und STAT5-Proteinen, wobei Wildtyp-FLT3 nur eine geringfügige STAT5-Aktivierung induziert.
• FLT3 befindet sich auf der Zellmembran und im Lumen des Endoplasmatischen Retikulums.
• Die Expression wird im Knochenmark, bei hämatopoetischen Stammzellen, myeloischen und Granulozyten/Makrophagen-Vorläuferzellen nachgewiesen; zusätzlich in Leber, Thymus, Milz, Lymphknoten, Niere und Bauchspeicheldrüse, mit hohen Gehalten bei T-Zell-Leukämie.
• Mutationen, die zu konstitutiver Kinaseaktivität führen, treiben die Zellproliferation und Resistenz gegen Apoptose über mehrere Signalwege an, was FLT3 als Protoonkogen und eine wichtige Krankheitsvariante bei akuter myeloischer Leukämie hervorhebt.
• Als Glykoprotein und Phosphoprotein durchläuft FLT3 alternatives Spleißen und unterliegt der Ubiquitin-Konjugation; es spielt auch eine Rolle bei Wirt-Virus-Interaktionen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper gegen Phosphorylierungsstellen gerichtet ist, verwenden Sie Lysepuffer, die mit Phosphataseinhibitoren versetzt sind, um das Phospho-Epitop während der Probenvorbereitung für den Western Blot zu erhalten.
• Erwägen Sie die Stimulation von FLT3-exprimierenden Zellen (z. B. Leukämielinien) mit FLT3-Ligand oder die Behandlung mit Kinaseinhibitoren, um die phosphorylierungsspezifische Detektion zu bestätigen.
• Für ELISA kann das Immunogen-Phosphopeptid als Positivkontrolle dienen; Plattenbeschichtung und Detektionsbedingungen können eine Optimierung erfordern.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität durch Vergleich von Signalen aus Wildtyp- und Phosphatase-behandelten Lysaten oder durch Verwendung von ortsgerichteter Mutagenese von Y589/Y591.

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