Anti-Phospho-FAK-Y576/Y577 Kaninchen Monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q05397

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von FAK (Focal Adhesion Kinase 1)

• FAK (PTK2) ist eine nicht-Rezeptor-Protein-Tyrosinkinase, die vom PTK2-Gen kodiert wird; Isoform 6 (FRNK) fehlt die Kinasedomäne und wirkt als endogener Inhibitor der FAK-Signaltransduktion.
• Es spielt eine zentrale Rolle bei der Integrin-vermittelten Signaltransduktion und reguliert Zelladhäsion, Ausbreitung, Migration und Zytoskelett-Umgestaltung an Fokaladhäsionen.
• Nach Aktivierung bildet FAK Signalkomplexe mit Kinasen der SRC-Familie, was zur Phosphorylierung mehrerer nachgeschalteter Effektoren einschließlich Mitgliedern der CAS-Familie führt und die MAP-Kinase- und PI3K/AKT-Signalwege fördert.
• Insbesondere phosphoryliert FAK NEDD9 nach Integrinstimulation, was die nachgeschalteten Effekte auf die Zellmotilität erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:9360983
• Subzellulär lokalisiert sich FAK an Fokaladhäsionen, der Zellrinde, perinukleären Zytoplasma, Zentrosomen und im Zellkern, was seine dynamischen Rollen bei der Signalübertragung von der Membran zum Zellkern widerspiegelt.
• FAK wird ubiquität exprimiert und ist in B- und T-Lymphozyten, Fibroblasten und Epithelzellen nachweisbar (PubMed:31630787). Verwandte Referenzen: PMID:31630787
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung an mehreren Tyrosinresten (z. B. Y576/Y577 für die Aktivierung), Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Kinaseaktivität, Gerüstfunktionen und Protein stabilität modulieren.
• Wichtige biologische Prozesse an denen FAK beteiligt ist, umfassen embryonale Entwicklung, Angiogenese, neuronale Migration und Osteoblastendifferenzierung, was seine Bedeutung über die Zelladhäsion hinaus unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid erzeugt, das den Resten um Y576 und Y577 von menschlichem FAK entspricht. Für den Western Blot empfiehlt sich die Verwendung einer Positivkontrolle wie Lysate von Zellen, die mit Fibronectin oder Wachstumsfaktoren stimuliert wurden, um die FAK-Phosphorylierung zu induzieren.
• Um Phosphorylierungssignale zu erhalten, fügen Sie den Lysepuffern Phosphataseinhibitoren hinzu und vermeiden Sie übermäßige Probenhandhabung.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus-FAK, was seine Verwendung in Mausmodellstudien ermöglicht; dennoch wird eine Validierung im jeweiligen Probensystem empfohlen.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Beschichtung mit einem Phosphopeptid-Antigen als Positivkontrolle zur Beurteilung der Antikörperspezifität dienen.

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