Anti-Phospho-ERK1-T202/Y204 + ERK2-T185/Y187 Kaninchen pAb für WB, IF, ELISA - P28482 / P27361

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ERK1/ERK2-Funktion und -Lokalisierung

• MAPK1 (ERK2, p42-MAPK) und MAPK3 (ERK1, p44-MAPK) sind Serin/Threonin-Kinasen, die den Kern des MAPK/ERK-Signalwegs bilden und Zellwachstum, Adhäsion, Überleben und Differenzierung durch Phosphorylierung von über 160 Substraten regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:35831023
• Phosphoryliert Phosphoglyceratkinase PGK1 unter Hypoxie und leitet sie zu Mitochondrien, um die Acetyl-CoA-Produktion aus Pyruvat zu unterdrücken. Verwandte Referenzen: PMID:26942675
• Lokalisiert dynamisch zwischen Zytoplasma und Zellkern und ist auch am Zytoskelett, Zentrosom, Fokalkontakten und Caveolae zu finden, wodurch die Kinaseaktivität mit spezifischen zellulären Funktionen verknüpft wird.
• Die Doppelphosphorylierung an Thr185/Tyr187 in ERK2 (und Thr202/Tyr204 in ERK1) ist für die katalytische Aktivierung essentiell; dieser Antikörper erkennt spezifisch die phosphorylierte Aktivierungsschleife.
• Wirkt als transkriptioneller Repressor durch direkte Bindung an eine [GC]AAA[GC] DNA-Konsensussequenz, unabhängig von seiner Kinaseaktivität.
• Spielt eine entscheidende Rolle bei der Rezeptor-Tyrosinkinase-Signalgebung (z.B. KIT), der Insulin-Signalgebung und dem Zellzyklusfortschritt und ist mit verschiedenen Krebsarten und Entwicklungsstörungen in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das von der Aktivierungsschleife von humanem ERK2 abgeleitet ist; aufgrund der hohen Sequenzkonservierung ist eine Kreuzreaktivität mit der homologen phosphorylierten Region von ERK1 zu erwarten.
• In WB erscheinen typische Banden bei ~42 kDa (Phospho-ERK2) und ~44 kDa (Phospho-ERK1) nach Stimulation; bestätigen Sie die Phospho-Spezifität durch Vergleich mit unbehandelten oder Phosphatase-behandelten Lysaten.
• Für IF/ICC erwägen Sie eine Doppelfärbung mit einem Gesamt-ERK1/ERK2-Antikörper, um den Aktivierungsstatus und die subzelluläre Translokation zu validieren.
• Zusätzliche Banden nahe 36–43 kDa können Spleißvarianten, posttranslationale Modifikationen oder Abbauprodukte darstellen; validieren Sie dies im relevanten Proben system.
• ELISA-Anwendungen können für den quantitativen Nachweis von phosphoryliertem ERK in Zell- oder Gewebelysaten geeignet sein; optimieren Sie entsprechend die Beschichtungs- und Nachweisbedingungen.

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