Anti-Phospho-ErbB4/HER4-Y1284 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q15303

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von ErbB4/HER4

• Rezeptor-Tyrosinprotein-Kinase erbB-4 (ErbB4/HER4) ist ein Mitglied der Familie der epidermalen Wachstumsfaktorrezeptoren (EGFR/ErbB), zu der auch EGFR/ErbB1, ErbB2 und ErbB3 gehören.
• Wirkt als Zelloberflächenrezeptor für Neureguline (NRG1-4) und Mitglieder der EGF-Familie (BTC, EREG, HBEGF), löst Dimerisierung und Autophosphorylierung aus, um nachgeschaltete Signalkaskaden zu initiieren.
• Reguliert kritische Entwicklungsprozesse wie die Herzmuskeldifferenzierung, die Entwicklung des Zentralnervensystems (Wanderung der Neuralleiste und Axonleitung) sowie die Differenzierung der Milchdrüse und Laktation.
• Alternatives Spleißen erzeugt funktional unterschiedliche Isoformen (z. B. JM-A, JM-B, CYT-1, CYT-2), die sich in ihren Signalgebungskapazitäten unterscheiden, wie der Aktivierung des PI3K/AKT-Signalwegs und der nukleären Translokation.
• Proteolytische Prozessierung von JM-A-Isoformen setzt lösliche intrazelluläre Domänen (4ICD) frei, die in den Kern translozieren, um die Transkription zu regulieren (z. B. STAT5A-vermittelte Expression von Milchproteinen) oder zu den Mitochondrien wandern, um Apoptose zu fördern.
• Die subzelluläre Lokalisierung erstreckt sich auf Zellmembran, Kern und Mitochondrien, was seine vielfältigen Signalrollen widerspiegelt.
• Wird in den höchsten Konzentrationen in Gehirn, Herz und Niere exprimiert, mit geringeren Gehalten in Thymus, Lunge, Speicheldrüse und Bauchspeicheldrüse; die Isoform JM-B wird überwiegend im Herzen exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Tyrosinphosphorylierung, Glykosylierung und Ubiquitinierung mit Schlüsselrollen bei der Signaltransduktion und der Rezeptor-Herunterregulation.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid gerichtet, das den Resten um Y1284 von humanem ErbB4 entspricht; überprüfen Sie die Spezifität mit Phosphatase-behandelten Kontrollen oder nicht phosphorylierter Peptid-Konkurrenz in Ihrem Assaysystem.
• Für Western Blot (WB) erwarten Sie eine Hauptbande bei etwa 147 kDa; optimieren Sie die Blockierung und Antikörperverdünnung, um unspezifische Bindung zu reduzieren, insbesondere in komplexen Gewebslysaten.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) fügen Sie Permeabilisierungsschritte hinzu und validieren Sie die Kolokalisierung des Phosphosignals mit Membran- oder Kernmarkern je nach Isoform-Kontext.
• Für ELISA erwägen Sie die Verwendung eines Capture/Detection-Paares mit einem gesamten ErbB4-Antikörper, um das Phosphosignal zu normalisieren und quantitative Genauigkeit sicherzustellen.
• Da die ErbB4-Signalgebung kontextabhängig ist, validieren Sie Ergebnisse in physiologisch relevanten Zelllinien (z. B. MCF-7 für Brust, H9c2 für Herz) mit bekannter NRG1-Stimulation.

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