Anti-Phospho-eIF4E-S209 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P06730

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: eIF4E Funktion und Lokalisation

• Der eukaryotische Translationsinitiationsfaktor 4E (eIF4E) ist ein 25 kDa großes mRNA-Cap-bindendes Protein und die geschwindigkeitsbestimmende Untereinheit des eIF4F-Komplexes. Er erkennt die 7-Methylguanosin (m7G)-Cap und rekrutiert Ribosomen für die cap-abhängige Translationsinitiation (PubMed:16271312, PubMed:22578813). Verwandte Referenzen: PMID:16271312 PMID:22578813
• Im Kern fördert eIF4E den Export einer Untergruppe von mRNAs, darunter CCND1, NOS2/iNOS und MDM2, über einen XPO1-abhängigen Signalweg und beeinflusst dadurch den Zellzyklusablauf und die Apoptose (PubMed:23471078, PubMed:22684010). Verwandte Referenzen: PMID:23471078 PMID:22684010
• eIF4E reguliert zudem das mRNA-Spleißen, die 3'-End-Prozessierung und die stabile Cap-Bildung, indem es den Kernexport und die Translation von mRNAs der Spleiß- und Cap-Bildungsmaschinerie steuert (PubMed:11606200). Verwandte Referenzen: PMID:11606200
• Gemeinsam mit EIF4G1 antagonisiert eIF4E das Scannen und ist erforderlich für die TISU-Element-vermittelte Translation, einen cap-abhängigen, aber Scanning-unabhängigen Initiationsmechanismus (PubMed:29987188). Verwandte Referenzen: PMID:29987188
• Im Zytoplasma ist eIF4E Bestandteil von P-Bodies und Stressgranula, wo er an der Translationsrepression und mRNA-Speicherung beteiligt ist und dadurch die mRNA-Stabilität reguliert (PubMed:24335285). Verwandte Referenzen: PMID:24335285
• eIF4E wird an mehreren Stellen phosphoryliert, darunter S209, was seine Cap-Bindungsaffinität und Translationsaktivität moduliert; zudem wurde Acetylierung beschrieben.
• Das Protein ist mit Autismus-Spektrum-Störungen (AUTS19) assoziiert und spielt eine Rolle bei Wirt-Virus-Interaktionen, was seine breite biologische Bedeutung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid erzeugt, das Resten um S209 entspricht; er wird zum Nachweis von an S209 phosphoryliertem eIF4E empfohlen, nicht für gesamtes eIF4E.
• Für Western Blotting empfehlen Sie eine Blockierung mit BSA statt Milch, um Hintergrundsignale durch Interferenz mit Phospho-Epitopen zu reduzieren. Eine Positivkontrolle wie serumstimulierte Zelllysate kann verwendet werden.
• Die Behandlung von Zelllysaten mit Lambda-Phosphatase kann als Negativkontrolle dienen, um das phosphorylierungsabhängige Signal zu bestätigen.
• Der Antikörper wurde für ELISA validiert; für quantitative Assays kann die Paarung mit einem Gesamt-eIF4E-Antikörper eine Normalisierungsreferenz liefern.

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