Anti-Phospho-eIF2α-S51 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P05198

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: eIF2α-Funktion und Lokalisierung

• Eukaryotischer Translationsinitiationsfaktor 2 Untereinheit 1 (eIF2α) ist eine Kernkomponente des heterotrimeren eIF2-Komplexes, auch bekannt als eIF-2-alpha, eIF-2A oder eIF2-alpha. Zusammen mit eIF2β und eIF2γ steuert er die frühen Schritte der cap-abhängigen Proteinsynthese. Verwandte Referenzen: PMID:16289705
• Es bildet einen ternären Komplex mit GTP und der initiatorischen Methionyl-tRNA, die sich dann mit der 40S-ribosomalen Untereinheit assoziiert und die Rekrutierung von mRNA erleichtert, um einen 43S-Präinitiationskomplex zu bilden. Die anschließende GTP-Hydrolyse und die Freisetzung von eIF2-GDP ermöglichen die Bildung des 80S-Komplexes. Verwandte Referenzen: PMID:16289705
• Die Phosphorylierung an Serin 51 (S51) durch stressaktivierte Kinasen (HRI, PKR, PERK, GCN2) wandelt eIF2α in einen globalen Translationsinhibitor um, ein zentrales Ereignis der integrierten Stressantwort (ISR). Dies dämpft die allgemeine Proteinsynthese, während selektive mRNAs wie ATF4 und QRICH1 hochreguliert werden, was die zelluläre Anpassung an Stress ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:19131336 PMID:33384352
• Über die Translationskontrolle hinaus fördert phosphoryliertes eIF2α eine PRKN-unabhängige Mitophagie, indem es bei mitochondrialen Schäden an die äußere Mitochondrienmembran wandert, was eine direkte Verbindung zwischen der Translationsumprogrammierung und der Qualitätskontrolle von Organellen herstellt. Verwandte Referenzen: PMID:38340717
• eIF2α ist vorwiegend zytoplasmatisch und kann unter ungünstigen Bedingungen in Stressgranula konzentriert sein. Es lokalisiert sich auch nach stressinduzierter Phosphorylierung an die Mitochondrienoberfläche und wurde im Zytosol nachgewiesen.
• Dieses Protein unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, die seine Aktivität, subzelluläre Zielgebung und Interaktionen feinabstimmen.
• Als hochkonserviertes Protein wird eIF2α in menschlichen, murinen und rattengewebigen Geweben exprimiert, was seine wesentliche Rolle bei der Translationskontrolle und dem zellulären Stressmanagement unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den S51-Bereich von humanem eIF2α (NP_004085.1) überbrückt; daher ist der Antikörper darauf ausgelegt, die phosphorylierte Form zu erkennen. Nicht-phosphoryliertes eIF2α wird möglicherweise nicht erkannt.
• Für Western Blots fügen Sie Phosphataseinhibitoren den Lyse- und Inkubationspuffern hinzu, um das S51-Phosphorylierungssignal zu erhalten. Überprüfen Sie die Antikörperspezifität, indem Sie die Proben vor der Analyse mit λ-Phosphatase oder Kälberdarm-Phosphatase behandeln.
• Da die eIF2α-Phosphorylierung unter Stressbedingungen oft schnell und vorübergehend ist, optimieren Sie den Zeitpunkt der Probenvorbereitung und die Stressinduktionsprotokolle (z. B. Serumhungersnot, endoplasmatischer Retikulum-Stress oder Aminosäureentzug) im entsprechenden Zell- oder Gewebesystem.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie ein Erfassungs-/Detektionspaar in Betracht ziehen, das zwischen Gesamt- und Phospho-eIF2α unterscheidet, wenn eine gleichzeitige Quantifizierung beider Formen erforderlich ist; validieren Sie den Assay mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.

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