Anti-Phospho-EGFR-Y1172 Kaninchen pAb für WB, ELISA – P00533

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EGFR

• EGFR ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die nach Ligandenbindung wichtige Signalwege aktiviert – darunter RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC und STAT-Module – und dadurch die Zellproliferation, Differenzierung und das Überleben reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• Zu den bekannten Liganden gehören EGF, TGFA, AREG, EPGN, BTC, EREG und HBEGF, die die Homo- oder Heterodimerisierung des Rezeptors und die Autophosphorylierung an zytoplasmatischen Tyrosinresten auslösen. Verwandte Referenzen: PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Zusätzlich zu kanonischen Signalwegen phosphoryliert EGFR direkt RGS16 (aktiviert dessen GTPase-Aktivität) und MUC1 (verstärkt dessen Interaktion mit SRC und Beta-Catenin), wodurch es mit G-Protein-gekoppelten Rezeptorsignalwegen und der Zelladhäsion verbunden wird. Verwandte Referenzen: PMID:11602604, PMID:11483589
• EGFR aktiviert zudem den NF-kappa-B-Signalweg und interagiert mit CCDC88A/GIV an der Zellmembran, um eine anhaltende Zellmigration zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:11116146, PMID:20462955
• Isoform 2, die durch alternatives Spleißen entsteht, fehlt die Kinaseaktivität und sie kann als Antagonist der EGF-Wirkung wirken; sie ist insbesondere bei Ovarialkarzinomen exprimiert.
• Subzellulär lokalisiert EGFR sich an der Zellmembran, im endoplasmatischen Retikulum, Golgi-Apparat, Endosomen, Zellkern und kann sekretiert werden – dies spiegelt seine dynamischen Transport- und Signalfunktionen wider.
• EGFR wird ubiquitär in menschlichen Geweben exprimiert, wird als Phosphoprotein, Tyrosinprotein-Kinase und Protoonkogen klassifiziert und dient als Wirtszellrezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein phosphospezifisches Peptid rund um Y1172 entwickelt; stellen Sie sicher, dass Lysepuffer Phosphatase-Inhibitoren enthalten, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Für Western Blot erwarten Sie eine Bande bei ca. 134 kDa unter standardmäßigen reduzierenden Bedingungen; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker.
• Bei der Durchführung von ELISA kann das immunogene Phosphopeptid als Positivkontrolle zur Validierung der Antikörperspezifität dienen.
• Validieren Sie den Antikörper im entsprechenden Zelllinien- oder Gewebesystem mit bekannter EGFR-Expression und Phosphorylierungsstatus, verwenden Sie wenn möglich unbehandelte gegenüber EGF-stimulierten Proben.

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