Anti-Phospho-DRP1-S616 Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - O00429

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Dynamin-1-ähnlichen Proteins (DNM1L)

• DNM1L (auch bekannt als DRP1, DLP1, DVLP, Dymple, HdynIV, dynamin-related protein 1) ist ein Mitglied der Dynamin-Familie großer GTPasen, codiert durch das DNM1L-Gen auf dem menschlichen Chromosom 12. Es ist ubiquitär exprimiert, mit den höchsten Spiegeln in Skelettmuskel, Herz, Niere und Gehirn. Es existieren mehrere Isoformen: Isoform 1 ist gehirnspezifisch, Isoform 2 überwiegt im Hoden, Isoform 3 im Skelettmuskel, Isoform 4 ist schwach im Gehirn/Herz/Niere exprimiert, Isoform 5 in Leber/Herz/Niere und Isoform 6 in Neuronen.
• Das Protein vermittelt die mitochondriale und peroxisomale Teilung, indem es zu helikalen Strukturen oligomerisiert, die Membranen in einem GTP-Hydrolyse-abhängigen Mechanismus einschnüren und durchtrennen (PubMed:11514614, PubMed:12499366, PubMed:17301055, PubMed:23530241, PubMed:23584531, PubMed:33850055). Verwandte Referenzen: PMID:11514614, PMID:12499366, PMID:17301055, PMID:23530241, PMID:23584531, PMID:33850055
• Die Rekrutierung von DNM1L an mitochondriale Spaltungsstellen wird durch Membranrezeptoren wie MFF, MIEF1 und MIEF2 gefördert (PubMed:23283981, PubMed:23921378, PubMed:29899447). Die GTP-Hydrolyse induziert die Dissoziation von den Rezeptoren und ermöglicht das Krümmen der Filamente zu geschlossenen Ringen, die wahrscheinlich die Doppelmembran durchtrennen (PubMed:29899447). Verwandte Referenzen: PMID:23283981, PMID:23921378, PMID:29899447
• Es spielt eine wesentliche Rolle bei der mitochondrialen Fragmentierung während der Mitose (PubMed:19411255, PubMed:26992161, PubMed:27301544) und wirkt stromabwärts von PINK1, um eine Fragmentierung auf PRKN-abhängige Weise zu fördern (PubMed:32484300). Verwandte Referenzen: PMID:19411255, PMID:26992161, PMID:27301544, PMID:32484300
• DNM1L ist für die normale Gehirnentwicklung erforderlich, einschließlich des Kleinhirns, und sichert das Überleben postmitotischer Neuronen durch Unterdrückung oxidativer Schäden (PubMed:17460227, PubMed:26992161, PubMed:27145208). Es erleichtert die entwicklungsregulierte Apoptose während der Neuralrohrbildung. Verwandte Referenzen: PMID:17460227, PMID:26992161, PMID:27145208
• Das Protein trägt zur Apoptose bei, indem es die Freisetzung von Cytochrom c und die Kaspase-Aktivierung fördert, und ist für den programierten Zelltod (Nekrose) erforderlich (PubMed:22265414). Es reguliert auch die Dynamik der synaptischen Vesikelmembran durch Assoziation mit BCL2L1 (PubMed:17015472, PubMed:23792689). Verwandte Referenzen: PMID:22265414, PMID:17015472, PMID:23792689
• Rhythmische Phosphorylierung an Ser-637 bietet eine zirkadiane Kontrolle der mitochondrialen ATP-Produktion (PubMed:29478834). Verwandte Referenzen: PMID:29478834
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, äußere mitochondriale Membran, Peroxisomen, Golgi-Apparat, clathrinbeschichtete Gruben und synaptische Vesikel. Es zyklisiert zwischen zytosolischen und membrangebundenen Beständen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (z. B. Ser-616, Ser-637), Acetylierung, S-Nitrosylierung und Ubiquitin-Konjugation, die seine Aktivität, Stabilität und Wechselwirkungen regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phospho-Peptid erhoben, das der Phosphorylierung von Ser-616 von humanem DRP1 entspricht. Für WB- und ELISA-Anwendungen sollten Sie Proben verwenden, bei denen eine DRP1-S616-Phosphorylierung erwartet wird, wie z. B. Zellen, die eine aktive mitochondriale Fragmentierung oder Apoptose durchlaufen.
• Verwenden Sie als phosphospezifischer Antikörper immer Phosphatase-Inhibitoren in Lysepuffern und validieren Sie die Spezifität durch Phosphatase-Behandlung oder Blockierung mit nicht-phosphoryliertem Peptid.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung und Inkubationsbedingungen in Ihrem relevanten Probensystem (z. B. HeLa, HEK293 oder Gewebelysate); ein typischer Startbereich für WB kann 1:500–1:2000 betragen, aber empirische Tests sind unerlässlich.
• Für ELISA bestätigen Sie die Plattenbeschichtung und Nachweisprotokolle mit Ihrem Antigen; das Immunogen-Peptid kann als Positivkontrolle dienen, um die Assay-Leistung zu bewerten.

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