Anti-Phospho-Cytokeratin 8 (KRT8)-S74 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P05787

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Cytokeratin 8 (KRT8) Funktion und Lokalisierung

• Keratin 8 (KRT8), auch bekannt als Cytokeratin-8 (CK-8) und Typ-II-Keratin Kb8, ist ein Typ-II-Intermediärfilamentprotein, das beim Menschen durch das KRT8-Gen kodiert wird.
• Zusammen mit seinem obligaten Typ-I-Partner KRT18 bildet KRT8 das Keratin-Intermediärfilamentnetzwerk, das einfachen Epithelzellen mechanische Stabilität und Widerstandsfähigkeit verleiht. Verwandte Referenzen: PMID:26823019
• KRT8 ist auch am Schutz von Zellen vor nicht-mechanischem Stress, wie z.B. Apoptose, beteiligt.
• Es wird für die ARHGEF40-vermittelte Bildung von Aktin-Stressfasern und die durch Zugkraft induzierte Verstärkung von Stressfasern benötigt. Verwandte Referenzen: PMID:26823019
• In quergestreifter Muskulatur können KRT8 und KRT19 dazu beitragen, den kontraktilen Apparat an Dystrophin an den Costameren zu koppeln. Verwandte Referenzen: PMID:16000376
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Nukleoplasma, Kernmatrix und Zytoskelett.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung regulieren die KRT8-Funktion; dieser Antikörper erkennt spezifisch die Phosphorylierung an Serin 74.
• Die Gewebeexpression wird in einfachen Epithelzellen, einschließlich Gingivalschleimhaut und hartem Gaumen, sowie in Muskelfasern an Costameren beobachtet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid um Ser74; um die Phospho-Spezifität zu bestätigen, vergleichen Sie die Signale mit und ohne Phosphatasebehandlung oder verwenden Sie einen Wettbewerbsassay mit nicht-phosphoryliertem Peptid.
• Beim Western Blot liegt die erwartete Bande bei ~54-56 kDa. Validieren Sie die Detektion in Ihrem Probentyp und optimieren Sie die Antikörperverdünnung empirisch.
• Für ELISA sollten Sie das Phosphopeptid als Beschichtungsantigen verwenden und eine Kontrolle mit nicht-phosphoryliertem Peptid einschließen.
• Die Kreuzreaktivität ist nur für human angegeben; bei Verwendung anderer Spezies führen Sie eine Validierung aufgrund möglicher Sequenzvariationen durch.
• Fügen Sie geeignete Ladekontrollen und Molekulargewichtsmarker für eine genaue Interpretation ein.

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