Anti-Phospho-CREB1-S133 Kaninchen pAb für WB, IHC-P, ELISA – P16220

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CREB1

• CREB1 (Cyclic AMP-responsive element-binding protein 1), auch bekannt als CREB oder CREB-1, ist ein Transkriptionsfaktor, der beim Menschen vom CREB1-Gen kodiert wird. Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen.
• Es fungiert als phosphorylierungsabhängiger transkriptioneller Aktivator durch Bindung an das cAMP-Antwortelement (CRE) in den Promotorregionen von Zielgenen. Die transkriptionelle Aktivität wird durch TORC-Koaktivatoren unabhängig von der Ser-119-Phosphorylierung verstärkt. Verwandte Literatur: PMID:14536081
• CREB1 spielt eine Schlüsselrolle in diversen zellulären Prozessen, einschließlich der Synchronisation von zirkadianen Rhythmen und der Differenzierung von Fettzellen.
• In Kardiomyozyten reguliert CREB1 die Expression von Genen der apopttotischen und inflammatorischen Antwort stromabwärts der ERFE-vermittelten AKT-Signalgebung.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist überwiegend nukleär, was mit seiner Funktion als Transkriptionsfaktor übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen sind für die Regulation von CREB1 von entscheidender Bedeutung: Es ist ein Phosphoprotein, bei dem die Phosphorylierung an Ser119 (und anderen Stellen) die Aktivität moduliert. Dieser Antikörper erkennt spezifisch die Phosphorylierung an Ser133, einem zentralen Aktivierungsort.
• Weitere Schlüsselwörter im Zusammenhang mit CREB1 umfassen Wirt-Virus-Interaktion, Ubiquitin-Konjugation und Beteiligung an chromosomalen Umlagerungen, was seine vielfältigen Rollen in Gesundheit und Krankheit unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Aufgrund des Immunogen-Designs (ein synthetisches phosphoryliertes Peptid im Bereich von Ser133 des menschlichen CREB1) wird erwartet, dass dieser Antikörper spezifisch die phosphorylierte Form von CREB1 an Ser133 erkennt. Validieren Sie die Spezifität durch Vergleich der Signale von mit Phosphatase behandelten und unbehandelten Proben in Ihrem experimentellen System.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande bei etwa 35 kDa zu erwarten. Optimieren Sie die Blockier- und Antikörper-Verdünnungsbedingungen, um eine saubere Detektion zu erreichen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) sollten Sie Antigen-Retrieval-Methoden verwenden, die mit phosphospezifischen Antikörpern kompatibel sind, und geeignete Kontrollen einschließen, um die phosphorylierungsabhängige Färbung zu bestätigen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-CREB1, was ihn für Studien an gängigen Modellorganismen geeignet macht; dennoch wird eine Sequenzausrichtung im Bereich der Phosphorylierungsstelle empfohlen, um die Konservierung des Epitops zu bestätigen.
• Bei ELISA-Anwendungen kann eine Optimierung des Beschichtungsantigens und der Detektionsbedingungen erforderlich sein; ein Phosphopeptid- versus Nicht-Phosphopeptid-ELISA kann bei der Beurteilung der Spezifität helfen.

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