Anti-Phospho-Chk2-T68 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O96017

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Chk2-Funktion und -Lokalisierung

• Die Serin/Threonin-Proteinkinase Chk2 (CHEK2, CDS1, RAD53-Homolog) spielt eine kritische Rolle beim checkpoint-vermittelten Zellzyklusarrest, der DNA-Reparatur und der Apoptose als Reaktion auf DNA-Doppelstrangbrüche.
• Wirkt als Tumorsuppressor; reguliert den Zellzyklusfortschritt auch während ungestörter Zyklen negativ und kann bei Abwesenheit zur chromosomalen Instabilität beitragen.
• Nach der Aktivierung phosphoryliert sie zahlreiche Effektoren bevorzugt an der Konsensussequenz [L-X-R-X-X-S/T].
  Verwandte Referenzen: PMID:37943659
• Reguliert den Zellzyklusarrest durch Phosphorylierung und Hemmung der CDC25A-, CDC25B- und CDC25C-Phosphatasen, was zur hemmenden Tyrosin-Phosphorylierung von CDK-Cyclin-Komplexen führt.
• Fördert die DNA-Reparatur durch Phosphorylierung von BRCA2 (Verbesserung der RAD51-Chromatin-Assoziation) und durch Stimulierung der Transkription von DNA-Reparaturgenen über FOXM1.
• Vermittelt Apoptose durch Phosphorylierung von p53/TP53 an Ser-20, MDM4 und PML sowie durch E2F1-abhängige Transkription von pro-apoptotischen Genen.
• Unter oxidativem Stress phosphoryliert sie TRIM32 an Ser-55, um die Ubiquitinierung von ATG7 und die Autophagie-Assemblierung zu fördern.
  Verwandte Referenzen: PMID:37943659
• Fördert die CCAR2-SIRT1-Assoziation und ist für die CCAR2-vermittelte SIRT1-Hemmung erforderlich.
  Verwandte Referenzen: PMID:25361978
• Lokalisiert vorwiegend im Zellkern (Nukleoplasma, PML-Körper); hochexprimiert in Hoden, Milz, Dickdarm und peripheren Blutzellen, mit geringerer Expression in anderen Geweben.
• Enthält Kinase-, ATP-Bindungs- und Nukleotid-Bindungsdomänen; klassifiziert als Phosphoprotein mit Rollen in der Mitose, Transkriptionsregulation und Wirt-Virus-Interaktion.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um T68, was eine Spezifität für die phosphorylierte Form nahelegt; verwenden Sie geeignete Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung, um Phospho-Signale zu erhalten.
• Für den Western Blot sollten Sie erwägen, Zellen mit DNA-schädigenden Mitteln (z. B. Etoposid, Bestrahlung) zu stimulieren, um die Chk2-Phosphorylierung vor der Lysatherstellung zu induzieren.
• Validieren Sie den Antikörper in menschlichen Proben; Hintergrundband(s) können auftreten, und es ist ratsam, Beladungs- und Detektionsbedingungen zu optimieren.
• Für ELISA kann das phosphorylierte Peptid als Beschichtungsantigen dienen, um die Spezifität zu bestätigen; negative Kontrollen unter Verwendung eines nicht-phosphorylierten Peptids werden empfohlen.
• Ein erwartetes Band nahe 61 kDa sollte im WB beobachtet werden; zusätzliche Bänder können Spleißvarianten oder posttranslationale Modifikationen widerspiegeln.

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