Anti-Phospho-Chk1-S345 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - O14757

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Chk1-Funktion und Lokalisierung

• Chk1 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die für den DNA-Schadens-Checkpoint essentiell ist. Sie wird für den Zellzyklus-Arrest und die Aktivierung der DNA-Reparatur als Reaktion auf DNA-Schäden oder nicht replizierte DNA benötigt. Verwandte Referenzen: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Sie erkennt das Substrat-Konsensus-Motiv [R-X-X-S/T] und phosphoryliert CDC25A, CDC25B und CDC25C, was zu deren Inhibition über 14-3-3-Bindung und proteasomalen Abbau führt, wodurch die CDK-Cyclin-Aktivität blockiert und der Zellzyklusfortschritt angehalten wird. Verwandte Referenzen: PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351
• Chk1 wird an mehreren Resten phosphoryliert, wobei Ser-345 eine Schlüsselstelle für ihre Aktivierung als Reaktion auf DNA-Schäden ist und ihre Kinaseaktivität und Checkpoint-Funktionen vermittelt.
• Chk1 phosphoryliert RAD51 an Thr-309, um die homologe Rekombinationsreparatur zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:15665856
• Sie phosphoryliert TP53 an mehreren Stellen, was dessen Stabilisierung und transkriptionelle Aktivität zur Induktion des Zellzyklus-Arrests verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Chk1 ist im Zellkern, an Chromosomen und Zentrosomen lokalisiert, was ihre Rolle in chromatinassoziierten Prozessen und der mitotischen Regulation widerspiegelt.
• Sie wird ubiquitär exprimiert, mit den höchsten Leveln im Thymus, Hoden, Dünndarm und Kolon.
• Alternatives Spleißen des CHEK1-Gens produziert eine endogene Repressor-Isoform, die den Übergang von der S- zur G2/M-Phase erleichtert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde unter Verwendung eines synthetischen Phosphopeptids entwickelt, das dem phosphorylierten Ser-345-Rest von humanem Chk1 entspricht. Dies gewährleistet Spezifität für die aktivierte, phosphorylierte Form der Kinase.
• Für Western Blot sollte die Zugabe von Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung in Betracht gezogen werden, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten. Validieren Sie die Phospho-Spezifität durch Behandlung von Proben mit Lambda-Phosphatase und Beobachtung des Signalverlusts.
• Der Antikörper wurde auf Reaktivität mit humanen, Maus- und Rattenproben getestet; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies sollte individuell validiert werden.
• In ELISA kann der Antikörper für den Nachweis von Phospho-Chk1 in Zelllysaten oder Peptid-basierten Assays geeignet sein. Optimieren Sie die Beschichtungs- und Nachweisbedingungen für Ihren spezifischen Aufbau.
• Angesichts der kritischen Rolle von Chk1 in der DNA-Schadensantwort ist dieser Antikörper ein nützliches Werkzeug für die Erforschung von Checkpoint-Signalgebung, Zellzyklusregulation und Krebsbiologie.

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