Anti-Phospho-Chk1-S296 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, ELISA - O14757

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CHK1-Funktion und -Lokalisierung

• CHK1 (Checkpoint-Kinase-1) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die vom CHEK1-Gen kodiert wird und durch alternatives Spleißen in mehreren Isoformen existiert.
• Sie ist essentiell für einen checkpoint-vermittelten Zellzyklusarrest und die Aktivierung der DNA-Reparatur als Reaktion auf DNA-Schäden oder nicht replizierte DNA, wodurch die genomische Integrität bewahrt wird. Verwandte Referenzen: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• CHK1 phosphoryliert die Phosphatasen der CDC25-Familie (CDC25A, B, C), was zu ihrer Hemmung und anschließenden Inaktivierung von CDK-Cyclin-Komplexen führt, was den Fortschritt des Zellzyklus blockiert. Verwandte Referenzen: PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:9278511
• Sie phosphoryliert TP53 direkt an mehreren C-terminalen Stellen, fördert die TP53-Aktivierung, den Zellzyklusarrest und die Unterdrückung der Zellproliferation. Verwandte Referenzen: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• CHK1 moduliert die homologe Rekombinationsreparatur durch Phosphorylierung von RAD51 an Thr-309, wodurch die Chromatin-Assoziation von RAD51 und die DNA-Reparatur verbessert werden. Verwandte Referenzen: PMID:15665856
• Zusätzliche Substrate umfassen FANCE (Kreuzreparatur), TLK1 (Chromatin-Assemblierung), SPRTN (Chromatin-Rekrutierung), PABIR1/FAM122A (G2/M-Checkpoint) und Histone (transkriptionelle Regulation), was seine vielseitige Rolle bei der Genomerhaltung unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:17296736, PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:31316063, PMID:33108758, PMID:17380128
• Subzellulär lokalisiert sich CHK1 im Zellkern, auf den Chromosomen, im Zytoplasma und am Zentrosom, was seinen vielfältigen Funktionen in der DNA-Schadenssignalisierung und der Kontrolle des Zellzyklus entspricht.
• CHK1 ist ubiquitär exprimiert, mit den höchsten Spiegeln in Thymus, Hoden, Dünndarm und Dickdarm, und seine Aktivität ist streng durch Phosphorylierung an mehreren Resten reguliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot: Fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren den Lysepuffern hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten, und validieren Sie die Bandengröße nahe 54 kDa.
• Testen Sie den Antikörper an Lysaten aus Zellen, die mit DNA-schädigenden Mitteln (z. B. Etoposid, Hydroxyharnstoff) behandelt wurden, um die Phospho-Spezifität an Ser296 zu bestätigen.
• Dieser Antikörper ist für menschliches Chk1 validiert; die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies sollte individuell bewertet werden.
• Für ELISA: Erwägen Sie die Beschichtung sowohl mit phosphorylierten als auch nicht-phosphorylierten Peptiden, um die Phospho-Selektivität zu demonstrieren.

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