Anti-Phospho-Chk1-S280 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - O14757

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Chk1-Funktion und -Lokalisierung

• Serin/Threonin-Proteinkinase Chk1 (CHEK1), auch bekannt als Checkpoint-Kinase-1, ist ein Schlüsselregulator von Zellzyklus-Kontrollpunkten und der DNA-Schädigungsantwort (PubMed:11535615, PubMed:12399544, PubMed:12446774). Verwandte Referenzen: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Funktioniert durch Phosphorylierung der CDC25-Familie von Phosphatasen (CDC25A, CDC25B, CDC25C) an spezifischen Serinresten, was zu ihrer Hemmung durch 14-3-3-Bindung oder proteasomalen Abbau führt, wodurch die CDK-Aktivierung verhindert und der Zellzyklusfortschritt angehalten wird (PubMed:9278511, PubMed:12676583, PubMed:12676925, PubMed:12759351). Verwandte Referenzen: PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351
• Phosphoryliert TP53 an mehreren C-terminalen Stellen, fördert die TP53-Acetylierung und -Aktivierung, was zum Zellzyklusarrest und zur Apoptose beiträgt (PubMed:10673501, PubMed:15659650, PubMed:16511572). Verwandte Referenzen: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Beteiligt an der DNA-Reparatur durch homologe Rekombination durch Phosphorylierung von RAD51 an Thr-309, was das RAD51-Chromatin-Laden erleichtert, und durch Regulation von FANCE bei der Vernetzungsreparatur (PubMed:15665856, PubMed:17296736). Verwandte Referenzen: PMID:15665856, PMID:17296736
• Lokalisiert primär im Zellkern und auf Chromosomen, findet sich aber auch im Zytoplasma und an den Zentrosomen, was die vielseitigen Rollen bei der Genomerhaltung widerspiegelt.
• Ubiquitär exprimiert, mit höchsten Spiegeln in Thymus, Hoden, Dünndarm und Dickdarm.
• Enthält eine ATP-bindende Kinasedomäne und wird durch Phosphorylierung reguliert; klassifiziert unter den Serin/Threonin-Proteinkinasen und beteiligt an DNA-Schädigungs- und Reparaturwegen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um S280 von humanem Chk1; bestätigen Sie die Antikörperspezifität durch Phosphatasebehandlung oder kompetitive Hemmung mit nicht-phosphoryliertem Peptid.
• Dieser Kaninchen monoklonale Antikörper ist für WB und ELISA validiert; erwägen Sie die Verwendung geeigneter positiver Kontrollen (z. B. humane Zelllinien, die mit DNA-schädigenden Agenzien behandelt wurden).
• Für WB: Fügen Sie Phosphataseinhibitoren zum Lysepuffer hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten; validieren Sie im relevanten Probensystem.
• Das vorhergesagte Proteingewicht beträgt 54 kDa; optimieren Sie den Gelanteil und die Transferbedingungen entsprechend.

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