Kaninchen-Polyclonaler Anti-Phospho-CDK9 (T186) Antikörper für WB, ELISA – P50750

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CDK9

• CDK9 ist die katalytische Untereinheit des positiven Transkriptionselongationsfaktors b (P-TEFb), die die C-terminale Domäne (CTD) der RNA-Polymerase II phosphoryliert, um eine produktive Transkriptionselongation zu ermöglichen. Verwandte Referenzen: PMID:10574912, PMID:10757782, PMID:11145967

• Es phosphoryliert ein breites Spektrum an Substraten, darunter DSIF, NELF, MYOD1, AR und KAT5, und reguliert dadurch Prozesse wie Transkriptionselongation, MuskelDifferenzierung und Histonacetylierung. Verwandte Referenzen: PMID:10912001, PMID:11112772, PMID:12037670, PMID:29335245, PMID:9857195

• CDK9 ist essenziell für zytokin-induzierte Transkriptionsnetzwerke und erleichtert die Promotorerkennung von Transkriptionsfaktoren wie RELA/p65 im TNF-Signalweg und STAT3 im IL-6-Signalweg. Verwandte Referenzen: PMID:17956865, PMID:18362169

• P-TEFb koordiniert kotranskriptionelle Histonmodifikationen (H2Bub1, H3K4me3, H3K36me3) und mRNA-Prozessierung und verbindet so Transkriptionselongation mit Chromatindynamik und RNA-Reifung. Verwandte Referenzen: PMID:15564463, PMID:19575011, PMID:19844166

• CDK9 trägt zur Erhaltung der Genomintegrität bei: Der CDK9/Cyclin-K-Komplex unterstützt die Erholung nach Replikationsstress, während Isoform 2 mit KU70/XRCC6 interagiert, um die DNA-Reparatur zu unterstützen. Verwandte Referenzen: PMID:20493174

• Das Protein lokalisiert sich im Zellkern, im Zytoplasma und in PML-Körperchen und wird ubiquitär exprimiert.

• CDK9 wird durch Phosphorylierung (unter anderem an T186) und Acetylierung reguliert und spielt eine Schlüsselrolle bei der viralen Replikation: Es fungiert als katalytische Untereinheit des Tat-assoziierten Kinasekomplexes während der HIV-Transkription. Verwandte Referenzen: PMID:10393184, PMID:11112772

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Validieren Sie die Phosphospezifität durch Vergleich der Signale von unbehandelten und mit Lambda-Phosphatase behandelten Lysaten im WB.
• Das Immunogen ist ein Phosphopeptid; der Antikörper kann Kreuzreaktionen mit nicht phosphorylierter CDK9 zeigen – bestätigen Sie dies mit geeigneten Kontrollen.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 43 kDa; verwenden Sie vorgefärbte Marker, die diesen Bereich abdecken, und optimieren Sie die Blockierungs- und Antikörperverdünnungsbedingungen.
• Stellen Sie im ELISA sicher, dass das beschichtete Antigen das T186-Phosphorylierungsmotiv exponiert; erwägen Sie die Verwendung von Phosphopeptid-Konkurrenten zur Beurteilung der Spezifität.

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