Anti-Phospho-CBL-Y774 Kaninchen pAb - P22681

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CBL-Funktion und -Lokalisierung

• CBL (Casitas B-Linien-Lymphom-Protoonkogen) ist eine RING-Typ-E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die als negativer Regulator diverser Signalwege fungiert, indem sie die Ubiquitinierung von Zelloberflächenrezeptoren und assoziierten Kinasen vermittelt, was zu ihrem proteasomalen Abbau führt (PubMed:10514377, 11896602, 14661060, 14739300, 15190072, 18374639, 21596750). Verwandte Referenzen: PMID:10514377 PMID:11896602 PMID:14661060 PMID:14739300 PMID:15190072 PMID:18374639 PMID:21596750

• Spezifische Substrate von CBL umfassen Rezeptor-Tyrosinkinasen (z. B. EGFR, KIT, PDGFR), SRC-Familien-Kinasen, SPRY2 und Immunrezeptoren wie LAG3, deren Ubiquitinierung die Downstream-Signalgebung oder Sortierung moduliert (PubMed:17094949, 17974561, 40101708, 28381567). Verwandte Referenzen: PMID:17094949 PMID:17974561 PMID:40101708 PMID:28381567

• CBL spielt eine kritische Rolle in der hämatopoetischen Signalgebung und ist essentiell für die Osteoklastendifferenzierung und Knochenresorption. Phosphorylierung bei Tyr-731 fördert die Rekrutierung von PI3K und ist für die Osteoklastenfunktion erforderlich (PubMed:14739300). Verwandte Referenzen: PMID:14739300

• Das Protein ist im Zytoplasma, der Zellmembran, den Cilien und dem Golgi-Apparat lokalisiert, was konsistent mit seinen Rollen im endozytischen Trafficking und der Signalbeendigung an der Plasmamembran ist.

• CBL enthält eine konservierte N-terminale Tyrosinkinase-Bindungsdomäne, eine RING-Finger-Domäne, die für ihre E3-Ligase-Aktivität verantwortlich ist, und eine C-terminale Prolin-reiche Region mit mehreren Phosphorylierungsstellen, einschließlich Tyr-774.

• Dieser Antikörper erkennt spezifisch CBL, das bei Tyr-774 phosphoryliert ist, eine Modifikation, die wahrscheinlich Protein-Protein-Wechselwirkungen und die Dynamik der Signaltransduktion beeinflusst.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das Tyr-774 umgibt; der Antikörper kann bevorzugt aktiviertes CBL in signalfähigen Proben nachweisen. Für Western Blot (WB) sollten Sie die Verwendung von Phosphatase-Inhibitoren während der Zelllyse in Betracht ziehen und die Spezifität mit einem Block durch unphosphoryliertes Peptid oder einer Dephosphorylierungsbehandlung validieren.
• Für ELISA kann phosphoryliertes CBL aus Zellextrakten unter nicht-denaturierenden Bedingungen aufgefangen werden; die Kombination mit einem Gesamt-CBL-Antikörper kann eine ratiometrische Phosphoprotein-Analyse ermöglichen.
• Da es sich um einen polyklonalen Kaninchenantikörper handelt, kann er Chargenunterschiede aufweisen; validieren Sie jede neue Charge im entsprechenden experimentellen System. Lagern Sie Aliquots bei -20°C oder -80°C, um wiederholte Gefrier- und Auftauzyklen zu vermeiden, und versenden Sie sie auf Eis, um die Aktivität zu erhalten.
• Es sind keine Daten zur Kreuzreaktivität mit anderen Spezies verfügbar; für Studien an Nicht-Menschen verifizieren Sie die Reaktivität in Ihrem Modellsystem.

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